玉竹抑制蛋白质非酶糖基化活性成分研究.doc

玉竹抑制蛋白质非酶糖基化活性成分研究*
王威,夏雪,师海波,李红岩,苗艳波
(吉林省中医药科学院,长春 130021)
[摘要] 目的:研究玉竹抑制蛋白质非酶糖基化有效部位的化学成分,阐明其物质基础。方法:采用ODS柱色谱对玉竹抑制蛋白质非酶糖基化有效部位进行分离组分的分离,通过牛血清白蛋白-葡萄糖(BSA-Glu)反应体系模型筛选,确定玉竹对蛋白质非酶糖基化抑制作用有效组分。采用ODS柱色谱和制备液相色谱手段对有效组分进行分离,应用包括一维和二维NMR等现代光谱技术鉴定化合物的结构。结果:采用蛋白质非酶糖基化抑制作用体外模型筛选为指导,从有效组分中分离得到6个化合物,分别鉴定为 3-(4’-hydroxybenzyl)-5,7-dihydroxy-6-methoxy-8-methylchroman-4-one(I), 3-(4’-hydroxybenzyl)-5,7-dihydroxy-6,8-dimethylchroman-4-one(II),3-(4’-hydroxybenzyl)-5, 6-dimethoxy-7-hydroxy -8-methylchroman-4-one(III),3-乙氧甲基-5,6,7,8-四氢-8-吲哚里嗪酮(3-ethoxymethyl-5,6,7,8-tetrahydroindolizin-8-one,IV),3-异丁基-6-异丙基-1,4-二氧杂环己烷-2,5-二酮(3-isobutyl-6-isopropyl-1,4-dioxane-2,5-dione,V),2-氨基-1-(3,5’-二甲氧基-4’-羟基苯基)-1,3-丙二醇[2-animo-1-(3,5’-dimethoxy-4’-hydroxyphenyl)propane-1,3-diol,VI]。结论:化合物I、III、V、VI为新化合物,化合物IV为首次从该植物中分离得到,为开发蛋白质非酶糖基化抑制剂提供了有价值的先导化合物和科学依据。
[关键词] 玉竹;蛋白质非酶糖基化;高氢异黄酮
* 国家自然科学基金资助项目(No. 30400587)
糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)是常见的糖尿病慢性微血管并发症之一,通常是指由于糖尿病引起的肾小球基底膜增厚,系膜扩张以及胞外基质增生,导致肾小球的高滤过和蛋白尿[1]。已有大量证据表明,持续高血糖引起机体多种蛋白质非酶糖基化,由此形成的非酶糖基化终末产物在糖尿病肾病的发病机制中起重要作用。因此,有效地阻断非酶糖基化反应、抑制非酶糖基化终末产物形成是防治糖尿病肾病发生发展的重要途径[2]。
玉竹始载于《神农本草经》,列为上品,源于百合科黄精属植物玉竹 Polygonatum odoratum (Mill.) Druce 的干燥根茎。具有养阴润燥,生津止渴之功能,用于肺胃阴伤,燥热咳嗽,咽干口渴,内热消渴。本课题组在对天然产物抑制蛋白质非酶糖基化活性筛选过程中,发现玉竹提取物对蛋白质非酶糖基化具有较强的抑制作用;采用STZ诱导糖尿病大鼠模型研究玉竹乙醇提取物分离部位对肾脏的保护作用,结果表明三氯甲烷分离部位降低糖尿病大鼠血中GHb水平和UAL排泄率,抑制肾皮质AGEs的形成,同时改善肾脏病理改变[3]。采用牛血清白蛋白-葡萄糖(BSA-Glu)反应体系模型筛选为指导,应用现代色谱和光谱技术从有效部位中分离和鉴定了6个化合物:3-(4’-hydroxybenzyl)-5,7-dihydroxy-6-methoxy-8-methylchroman-4-one(I), 3-(4’-hydroxybenzyl)-5,7-dihydroxy-6,8-dimethylchroman-4-one(II),3-(4’-hydroxybenzyl)-5, 6-dimethoxy-7-hydroxy -8-methylchroman-4-one(III),3-乙氧甲基-5,6,7,8-四氢-8-吲哚里嗪酮(3-ethoxymethyl-5,6,7,8-tetrahydroindolizin-8-one,IV),3-异丁基-6-异丙基-1,4-二氧杂环己烷-2,5-二酮(3-isobutyl-6-isopropyl-1,4-dioxane-2,5-dione,V),2-氨基-1-(3,5’-二甲氧基-4’-羟基苯基)-1,3-丙二醇[2-animo-1-(3,5’-dimethoxy-4’-hydroxyphenyl)propane-1,3-diol,VI]。
1 仪器与材料
Yanako显微熔点测定仪(温度计未校正);BRUKER AV-500型核磁共振波谱仪;Finnigan LCQTM离子阱质谱仪;输液泵NPL-500,日本精密科学株式会社;示差折光检测器RI