猫眼草活性成分提取物的肺癌抑制作用及其机制研究.pdf

谨以此论文献给我的老师、同学、亲人、朋友,感谢他们多年来对我无私的支持和帮助。并将此论文献给我的母校,在这里我度过了美好的学习时光。姜山
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,纵粞垒㈧河学位论文完成日期:孩詹濒猫眼草活性成分提取物的肺癌抑制作用及其机制研究指导教师签字:答辩委员会成员签字:
新粹々曰一学位论文作者签名:,耹同签字日期:凋签字目期:训年石月晟嘣翵日一’。学位论文版权使用授权书独创声諭何餷明垫逡查基丝重要挂别重塑的:奎拦亘窒蚱渌逃沟难换蛑な槭褂霉牟牧稀S胛本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ意。学位论文作者签名:
猫眼草活性成分提取物的肺癌抑制作用及其机制研究摘要肿瘤依然是人类尚未克服的严重威胁人类健康的疑难病症之一,其发病率和死亡率均居各类疾病之首。其中,肺癌发病率及死亡率高居首位。目前,肿瘤的防治仍然采取手术为主,放化疗为辅的策略,而药物学治疗是目前抗肿瘤防治研究最为活跃的领域。当前临床常用的抗肿瘤药约有七十余种,但仍不能有效控制肿瘤的发生与发展。尽管进入临床研究的抗肿瘤药物居高不下,但理想的高效低毒药物却寥寥无几。天然产物是抗肿瘤药物的重要来源。我国的药用植物种质资源丰富,中医药作为我国的国粹,中药的抗肿瘤活性已得到国际公认。猫眼草是中国传统中草药之一,其提取物抗肿瘤作用的研究已有部分报道,但关于其抗肿瘤活性的物质基础及其详细机制未有文献报道。本论文通过提取分离获得猫眼草中黄酮类物质的基础上,进一步观察了其体内对肺癌的作用,并探讨了其作用机制。⒚ㄑ鄄葜谢仆@辔镏实奶崛」ひ仗教采用均匀设计法研究从猫眼草中提取总黄酮的工艺,以乙醇为溶剂,考察了四个因素乙醇浓度ァ、乙醇用量疺~倍回流时间..小时⒒亓鞔问对猫眼草总黄酮提取率的影响,以确定最佳的提取工艺条件。并按设计方法进行了验证试验。结果表明:以原药材倍/的%醇水溶液,加热回流提取危看小时的条件,从猫眼草中提取总黄酮的提取率最高.%S酶霉ひ仗崛∶ㄑ鄄葑芑仆9ひ占虻ィ崛÷矢撸僮魅菀卓刂疲榷性好,适合于工业化生产。⒗醚G逡├硌侄危谙赴饺范嗣ㄑ鄄莼仆@啻痔嵛锏目怪琢鲎饔在确定猫眼草黄酮类粗提物具有抗肿瘤作用的基础上,进一步采用血清药理学方法,利用体外细胞培养技术,结合手段,研究了猫眼草黄酮类粗提物抗肿瘤作用的机制。结果发现,含猫眼草黄酮类粗提物兔血清可明显抑制肺癌细胞株
的增殖,且其抑制作用具有一定的浓度和时间相关性,%浓度下作用訟增殖的抑制率为.%。采用流式细胞技术发现,猫眼草黄酮类粗提物兔血清可明显阻滞肺癌细胞株于期,并出现明显的细胞凋亡。进一步采用手段观察了细胞周期相关及凋亡相关蛋白的变化,结果表明,含猫眼草黄酮类粗提物兔血清可以促进凋亡相关蛋白虲一鞍浊懈睿餚白活化,促进凋亡相关蛋白泶锷撸跎倏沟蛲鱿喙氐鞍譈表达及凋亡相关蛋白姿峄1砻骱ㄑ鄄莼仆@啻痔嵛锿醚G迥芄挥盏挤伟┫赴闍凋亡。⑷范嗣ㄑ鄄莼仆@啻痔嵛锞哂锌怪琢鲎饔谩利用荷伟┬∈笾琢龆锬P停ü鄄熘琢鲋亓勘浠兰哿嗣ㄑ鄄黄酮类粗提物体内对肿瘤生长的影响,并通过观察动物一般表现、体重变化及用药后动物的胸腺和脾脏重量的改变,初步评价药物的潜在的一般毒性及其对动物免疫功能的影响。结果发现,猫眼草黄酮类粗提物在./剂量下连续服用天,可明显抑制伟┰谛∈筇迥诘纳与模型组比较,.灾琢生长的抑制率分别为.%和.;猫眼草黄酮类粗提物在/剂量下连续服用天,对伟┰谛∈筇迥诘纳び幸欢ǖ囊种谱饔茫涠灾琢錾さ囊制率为.%,但与模型组比较无统计学意义。提示猫眼草黄酮类粗提物体内具有一定的抑制肿瘤生长的活性。猫眼草黄酮类粗提物在./剂量下连续服用天,对荷伟┬∈蟮男叵俸推⒃,但与模型组比较无统计学意义。相应计算的脾指数和胸腺指数也表现出了同样的趋势。提示其本身可能具有一定的影响机体免疫功能的作用,但也有可能是其抑制肿瘤生长后表现出来的间接效应。实验期间的一般观察发现,除环磷酰胺组和猫眼草黄酮类粗提物高剂量痥组动物略显消瘦外,各组动物的精神状态、饮食、饮水、大小便等