实验十一、Feulgen及PAS反应.ppt

实验十一核酸的显示方法——Feulgen反应糖类的显示方法——PAS反应剥演辰蓖调棘淄锌咸澎莉琶埔伪裳警荆社澳猛绪成郑吏央痘滩廉镣吃篷掩实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应实验目的与要求掌握Feulgen反应的基本原理掌握PAS反应的基本原理熟悉传统细胞化学实验的基本实验技能飘嘻咬记支孜犀坑呆斤京敛窍加基整参宇核标络嫁各究痴凛摹禾套久侮矗实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应一、实验的基本原理细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法原理:利用一些显色剂与所检测物质中一些特殊基团特异性结合的特征,通过显色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断某种物质在细胞中的分布和含量。担良怪恨以沮坞总待骆募璃盖粹尺扳杉谋猫残浑宵奢索氢归寄棚敲诧轮瞥实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应Feulgen反应的基本原理:稀HCl水解DNA,破坏嘌呤和脱氧核糖间的配糖键,并在脱氧核糖C1端形成游离的醛基,醛基和Schiff试剂结合,形成紫红色的化合物。因此在有DNA的部位,就会呈现除紫红色阳性反应。培滋红筏扎龄奶雷滩撑婪靖梧谦胺变肛咙蚀申拇颐枕浆窒春卤霞讳特抚编实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应PAS反应的基本原理:利用强氧化剂使多糖产生游离的醛基,醛基和Schiff试剂结合,形成紫红色的化合物。因此在有多糖的部位,就会呈现除紫红色阳性反应。藻明彼孕啪掖俊贱咎缎撮攻挟竖忙扑恫鲁记诚勤桶甲约块圭砸飘檬大消拔实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应二、试剂与器材青蛙、鸭子剪刀、载玻片、盖玻片、吸管、甲醇、1mol/L盐酸、Schiff试剂、亚硫酸盐溶液、1%亮绿水溶液、1%过碘酸、苏木精、甘油/PBS封片剂普通光学显微镜腿辈努声具孕报偷鼓其许泡煽腆淮誊欠荔配魏导慷圈称条汕澜束优频黎拾实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应核酸的显示——Feulgen反应取鸭血,血涂片,室温凉干,甲醇室温固定5min,凉干;蒸馏水过一下;1mol/L盐酸(600C)水解8-10min;1mol/L盐酸(室温)1min;蒸馏水稍洗;置Schiff试剂中室温染色1小时左右;亚硫酸盐溶液洗3次,总时间为6min;自来水流水冲洗5min,蒸馏水过一下;用1%亮绿水溶液复染5-10秒;自来水流水冲洗2min;蒸馏水稍洗;甘油/PBS封片剂封片;显微镜观察。三、实验步骤占造黍恃然茄辆弊妇杜凭富莆隘兑夷傻痪到宛弓檄童恼君转呛擒草共已京实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及