最终版杞菊地黄丸实验设计.docx

中药制剂分析设计性实验项目名称杞菊地黄丸(浓缩丸)的质量分析组长副组长成员专业年级所属院(部)填表日期**中医药大学药学院制杞菊地黄丸(浓缩丸)的质量分析实验目的:1、掌握中药浓缩丸的提取分离方法2、掌握中药浓缩丸的理化鉴别和含量测定方法实验原理:【处方】枸杞子40g菊花40g熟地黄160g山茱萸(制)80g牡丹皮60g山药80g茯苓60g泽泻60g 【制法】以上八味,取酒萸肉、牡丹皮、山药粉碎成细粉;泽泻、茯苓加水煎煮二次,第一次3小时,第二次2小时,滤过,-(60-80℃)的稠膏;熟地黄切片,加水煎煮三次,第一次3小时,第二次2小时,第三次1小时,滤过,-(60-80℃)的稠膏;枸杞子以45%乙醇作溶剂,剩余的酒萸肉与牡丹皮及菊花以70%乙醇作溶剂,浸渍24h后分别进行渗漉,收集渗漉液,合并上述渗漉液,-(60-80℃)的稠膏;与上述细粉与稠膏混匀,制成浓缩丸,干燥,打光,即得。【性状】本品为棕色至棕黑色的浓缩丸,味甜而酸HPLC具有高效、高速和高分辨率的优势。兼有分离和分析的作用,被广泛用于制剂和原料药的有关物质检查以及含量测定,常用外标一点法进行测定。不同药物中含有不同物质,其药理和特性理化性质不同,可用于对某一种或某一类药物的定性鉴别。实验材料:器材:高效液相仪分析天平塞锥形瓶冷凝管研钵量瓶剪刀超声处理设备回流装置(100ml圆底烧瓶,冷凝管,橡皮管,铁架台,夹子等)100ml具塞锥形瓶蒸发皿60ml分液漏斗等药品:处方中各类药材丹皮酚对照品试剂(甲醇乙酸乙酯二氯甲烷石油醚无水乙醇乙醚丙酮三氯甲烷甲酸甲苯盐酸冰醋酸硫酸环己烷三氯化铁香草醛等)实验操作:含量测定:按照高效液相色谱法(2015年版药典一部附录ⅥD)测定。牡丹皮色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇—水(70:30)为流动相;检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于3500。供试品溶液的制备:,精密称定。置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇(70ml甲醇+30ml水)50ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率33kHz)45分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过(),取续滤液,即得。对照品溶液的制备:取丹皮酚对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含20μg的溶液,即得。测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。标准:本品含牡丹皮以丹皮酚(C9H10O3)计,。阴性对照试验将供试品溶液,阴性对照溶液(按处方比例称取除牡丹皮外的其他药材同供试品溶液制备条件制备),丹皮酚对照品溶液各20ul,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件进行测定。(应该得到三个色谱图)结果阴性应无干扰。线性试验分别精密吸取对照品溶液4、8、12、16、20μl,按上述色谱条件,测定峰面积。以色谱峰峰面积(y)为纵坐标,对照品进样量(x)为横坐标,绘制标准曲线并进行线性回归,得回归方程,。精密度试验重复性:分别取同一批供试品,按供试品测定项下方法,重复制备样品6次,进行测定,计算含量平均值,结果用RSD值表示,一般要求RSD%<3%。稳定性试验(考察供试品溶液保存的时间)精密吸取同一供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,按上色谱条件,间隔不同时间0,、1h、2h、4h进行测定,计算RSD值(≤3%)。精密度试验(考察仪器的精密度)精密吸取同一对照品溶液10μl,注入液相色谱仪,按上条件进行测定,计算RSD值(≤3%)。中间精密度试验在同一个实验室,不同时间由不同分析人员,用不同设备测定结果之间的精密度,结果用RSD值表示,一般要求RSD%<3%。重复性试验对同一批号样品,按照供试品溶液制备方法制备6次,进行测定,计算RSD值(≤3%)。耐用性试验液相色谱法典型的变动因素:不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱,流动相的组成比例的变化,流动相pH值的变化,柱温,流速,检测波长等。按上述条件对同一批样品进行测定,计算含量和RSD值(≤3%)。加样回收率试验取已知含量的样品5份,,置烧杯中,加适量丹皮酚对照品,按照供试品溶液制备方法进行处理样品及测定,计算回收率和RSD值(≤3%)。样品含量测定取三批样品,各制备5份,按供试品溶液条件进行测定,计算RSD值(≤3%)。理化鉴别枸杞子:含枸杞多糖,又含甜菜碱(betaine)、阿托品、天仙子胺;另含玉蜀黍黄素(zeaxanthin)、酸浆红素(physalein)、隐黄质(cryptoxanthin)、东莨菪素(sc