食管癌术后早期肠内营养并发乳糜胸19例报告.docx食管癌术后早期肠内营养并发乳糜胸19例报告作者:廖爱军,苏琦,田锋,姚育红,曾斌【摘要】目的探讨湖南衡阳地区白细胞介素IB(IL1B)基因多态性与胃癌的关系以及幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,HP)感染后胃癌发生的易感基因型。方法52例胃癌患者癌旁正常胃粘膜组织和55例慢性胃炎患者胃粘膜组织,均经快速尿素酶和PCR检测HP,应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCRRFLP)分析技术,进行基因型检测,并对C/C、T/T进行测序,比较各基因型在胃癌组和胃炎组中的分布差异。结果IL /T基因型在胃癌组的分布频率高于胃炎组(p<),(95%〜)、(95%CI=〜4・39)(95%CI=1・10〜)、3・33(95%〜)。在伴有HP感染的群体中进行比较,IL1B31位点各基因型未见明显差异;但ILIB511T等位基因和ILIB511T/T基因型在胃癌组的分布频率高于胃炎组(P<),(95%〜)和3・43(95%CI=l・01〜)o结论在湖南衡阳地区ILIB31T/T、ILIB 511T/T基因型与胃癌发病风险相关,在HP被感染后ILIB511T/T基因型可能为湖南衡阳地区胃癌易感基因型。【关键词】白细胞介素1B;基因多态性;胃癌;幽门螺杆菌胃癌是由环境因素和遗传因素共同引发的恶性肿瘤。在环境因素中,HP感染是主要因素,被认为是胃癌发生的启动因素和促进因素。目前世界上已有半数以上的人被HP感染,但其中大多数为无症状感染者,只有极少数发展成胃癌,因而认为存在这些差别的原因既有HP本身的因素,也有宿主本身的因素。为此,本实验在湖南衡阳地区以慢性胃炎患者作为对照,探讨该地区患者被HP感染后IL1B31和IL1B511基因多态性与胃癌发生的关系。:72例胃癌标本均来自2005年3月〜2005年12月南华大学附一医院,经病理确诊(贲门癌除外),所有病例术前均未行放疗或化疗,术前2周未口服抗生素治疗。取胃窦部约0・5g癌旁正常粘膜组织(距癌灶>5cm)分为2块,1块行快速尿素酶检测HP,1块切成米粒大小置于-8(rc冰箱冻存。实验组及对照组患者均来自于湖南衡阳地区。对照组:70例标本来自本院胃镜室活检组织,无系统性红斑狼疮、炎性肠病、类风湿性关节炎和胃癌家族史,术前2周未口服抗生素治疗,病理确诊为慢性浅表性胃炎。取胃窦粘膜组织2块,1块行快速尿素酶检测HP,1块置于-8(TC冰箱冻存。,各取米粒大小一块,分别放入无菌EP管中用无菌眼科剪剪碎,按照上海生工DNA抽提试剂盒要求操作,DNA提取后于-2CTC冰箱中保存。HP的检测快速尿素酶法检测HP试剂盒由福建三强公司提供,按试剂盒要求操作,加入组织样本后5min内颜色逐渐变红为阳性,不变色则为阴性。PCR检测幽门螺杆菌(HP)UreA基因试剂盒由上海生工提供,引物参照文献[1]由上海生工合成,上游:5'GCCAATGGTAAATTAGTT3';下游:5’TTAATTGTTTTTAC3';扩增出的UreA基因片段长度为411bpo反应体系为25u1,,上、下游引物各1u1,模板DNA1u1,°C5min1个循环;94°Clmin,47°Clmin,72°Clmin,35个循环;72°C延伸lOmino产物于2%的琼脂糖凝胶(澳化乙锭染色)电泳,100V恒压30min,紫外灯下观察结果。出现411bp橙色条带的为HP阳性,无条带则为阴性,见图1。诊断标准及检测结果所有标本经两种方法检测HP,两种方法同为阳性则为HP阳性,同为阴性则为HP阴性,一阳一阴者剔除。最后测出实验组标本52例,对照组标本55例。(1)IL1B31和IL1B511位点PCR扩增引物由上海生工合成,序列为:IL1B31上游:51M:lOObpDNAmarker;1 4:HP阳性结果;5:AATACTC3'下游:5'TAGTTGTAAGGAAG3'。ILIB511上游:5‘TGGCATTGATCTGGTTCATC3,下游:5’ACTT3\扩增体系均为25ul,,上、下游引物各lul,模板DNAlul,。反应条件为94°C5min1个循环;94°C30s,57°C40s,72°C45s,35个循环;721延伸
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