细菌计数培养方法探讨.docx

细菌计数培养方法探讨.docx;2•丰宁县第二医院河北承德067000【摘要】目的:了解医院环境监测细菌计数时直接表面接种和倾注法检测结果的差别,为准确做好院感环境检测提供简单、可靠的方法。方法:用兼性厌氧的大肠埃希菌、专性需氧的铜绿假单胞菌和物体表面常见细菌的菌液,以表面定量接种和倾注法做菌落计数。结果:培养皿表面定量接种培养约24小时后,大肠埃希菌和铜绿假单胞菌菌落牛长都很典型检测结果为170和205。培养48小时数量没变化菌落略大。倾注法定量接种培养约24小时后,大肠埃希菌菌落牛长典型的为13,不典型菌落15&培养48小时候变为52,119;铜绿假单胞菌菌落生长典型的为8,不典型菌落192;培养约48小时后,生长典型的为26,179o随机擦拭100cm2消毒前物体表面到5毫升牛理盐水中,育•接表面接种50ul培养24小时后测得细菌数量为15cfu/cm2,倾注法得到10cfu/cm2;48小时后分别为15cfu/cm2和13cfu/cm2o结论:定量表面直接接种法更适合物体表面和各种液体标木中的细菌计数。【关键词】环境监测;细菌;菌落计数【中图分类号1R115 【文献标识码]B 【文章编号】1674-8999(2015)8・0442-02为了提高医疗安全,医院环境细菌学监测内容越来越得到重视,其中消毒液染菌量、透析液中细菌含量及各类物体表面细菌数量监测是最常见的检测内容。这类监测一般采用琼脂倾注法⑴检测,在实际工作中发现倾注法检测结果偏低切菌落计数时菌落辨认常常比较困难。为此我们采用了琼脂表面直接接种法,结果收到良好效果。、,按细菌数量为每毫升108计算进行稀释,将细菌含量稀释到每毫升约5000后用于实验。、25uk10ul分别接种配制好的营养琼脂表面,用接种环密涂后,送36°C;空气条件下培养。,将高压灭菌后冷却到约50°C的营养琼脂适量20-25ml倾入培养皿,按一个方向轻轻旋转使菌液和营养琼脂混合均匀,待琼脂凝固后送入培养箱培养。,计数完毕立即送冋培养箱继续培养隔夜后再计数一次。计数结果分易辨认和不易辨认分别计入。以没有菌落融合且可以分辨菌落较多平板作为计数用。3结果培养皿表面定量接种培养约24小吋后,大肠埃希菌和铜绿假单胞菌菌落生长都很典型检测结果为170和205。培养48小时数量没变化菌落直径略大。倾注法定量接种培养约24小吋后,大肠埃希菌菌落生长典型的为13,不典型菌落158;培养48小吋候变为52,119;铜绿假单胞菌菌落生长典型的为8,不典型菌落192;培养约48小吋后,生长典型的为26,179o经统计学处理两种检测方法大肠埃希菌计数无显著性差别p>;铜绿假单胞菌差别显著P<,直接表面接种50ul培养24小吋后测得细菌数量为15cfu/cm2,倾注法得到10cfu/cm2;48小时后分别为15cf