Daicel手性柱使用溶剂的限制.doc

1Daicel手性柱使用溶剂的限制众所周知,手性柱固定相对溶剂很敏感,使用时稍有不慎,即可对固定相造成不可修复的损伤。一般情况下,要避免使用的溶剂有丙酮、氯仿、二氯甲烷、THF和DMSO等,即使少量上述溶剂残留在管路、进样阀中也是色谱柱的潜在威胁,所以事先必须清洗干净。 2为什么柱效会降低?有没有再生方法? 所有大赛璐柱子在出厂前均已检测柱效合格。 造成柱效降低的原因有:1) 柱效急速下降绝大多数情况是色谱柱固定相被损伤(溶解/水解脱落),造成固定相损伤的物质可能来源于样品,溶剂,也可能来源于上一次进样残留于管路、进样阀中的杂质。这种情况对柱子冲洗或再生已无效。2) 柱效逐渐下降原因:有强保留物质逐渐聚集在柱头筛板甚至是固定相上解决办法:用强溶剂冲洗或更换筛板3) 旧柱子能分开的化合物换上新柱子就分不开了原因:“记忆效应”(有时,也有批次间的差异),一些强保留物质(如additive)保留在固定相上对手性诱导环境有一定的影响。解决办法:如果之前用过添加剂,就在流动相中继续添加此类添加剂,并对柱子平衡数小时再进样,但此方法有时仍然解决不了问题,这时应该可虑更换其它的分离条件。  3如果样品不溶于正己烷/醇体系,怎么办? 一般情况下,分析用时,-1mg/mL的浓度就可以满足检测,所以不用加大样品浓度对于酸、碱化合物,在流动相中适当的加入少量的强酸或强碱(如TFA/DEA)有助于样品的溶解,-%,大于此浓度会损坏固定相。   4几种常用手性柱的使用(以5μ和10μ填料为例)    1)ChiralpakAD    IPA:0-100%inalkane(n-hexaneoriso-hexane,orn-heptane)EtOH:0-15%inalkaneor60-100%inalkane(n-hexaneoriso-hexane,orn-heptane)MeOH:(1)0-100%EtOHorIPAinMeOHor0-15%ACNinMeOHIdealstartingconditions:MeOH/EtOH50:50(v/v)whenalcoholmixturesarerequired(2)0-15%inalkaneor60-100%inalkane(n-hexaneoriso-hexane,orn-heptane)【注意:使用纯极性溶剂做流动相后,此色谱柱应做到专柱专用】 ACN:patiblewithalkane0-100%or0-15%MeOHorEtOHinCAN【注意:使用纯极性溶剂做流动相后,此色谱柱应做到专柱专用】MTBE:NotallowedAcid:TFAorCH3COOH,<%,%    Base:DEAorButylamineorEthanolamine,<%,%   Column-Temp:below40DEG  2)ChiralpakAD-H同ChiralpakAD,不同之处在于,当使用正己烷/乙醇(甲醇)体系时,醇比例范围可以是0-100%3) ChiralpakOD-H同AD-H,不同之处在于,OD-H可以使用MTBE/alkane(或Alkane/EtOH),MTBE<50%,当使用MTBE后,色谱柱平衡时间要加长4) Chiralpa