新生儿溶血病血清学检查操作规程.doc

蒀袀羆遵医附院输血科蒄主题:血清学技术操作规范螂编号:01-3蚆薅内容:新生儿溶血病血清学检查操作规程袁螈蒆膈版本2008修订膇颁布日期:2008年8月莄修订日期:2008年7月莁新生儿溶血病血清学检查操作规程薇原理羇新生儿溶血病是由母婴血型不合引起,可见于ABO、Rh及MN等血型系统。胎儿和新生儿红细胞被来自母亲的IgG抗体包被,并在婴儿的单核-巨噬细胞系统(网状内皮系统)受到免疫性破坏,出现溶血,表现出相应的症状。病情严重程度因个体差异、抗体类型、抗体效价等不同而异。蒅目的蒀规范新生儿溶血病血清学检查操作;查找新生儿溶血病发生的原因,协助临床进行实验室诊断及治疗;保证临床用血的安全性和有效性。芁职责蚇输血科技术人员负责新生儿溶血病血清学检查。芃适用范围袂母婴血型不合引起的新生儿溶血病的血标本。螀支持文件莈《中国输血技术操作规程》(血站部分).天津:天津科学技术出版社1997芄《输血技术学》:人民卫生出版社,2002羀《输血科(血库)工作手册》莞市中心血站2006腿材料或设备袄材料抗-A、抗-D定型试剂、抗球蛋白试剂、ABO反定型试剂红细胞、筛选细胞、谱细胞、生理盐水、新生儿静脉血、产妇及患儿父亲血标本莅设备血清雪专用离心机、电热恒温水浴箱、水浴振荡仪、显微镜、小试管、滴管、小玻棒莃操作步骤蕿血标本采集及处理蚅采集患儿及其父亲与母亲血标本各3-5ml,分离出血清,配制3%-5%红细胞盐水悬液。如果患儿血标本为不抗凝血,则在一小玻璃漏斗颈部置一适当大小的棉球上,一边加生理盐水,一边用玻棒挤压血块,收集漏斗下面的红细胞悬液。膃患儿血标本蒁具体操作执行《ABO和Rh血型鉴定操作规程》。ABO血型测定只做正定型。羈直接抗球蛋白试验莅具体操作执行《抗球蛋白操作试验规程》中的直接抗球蛋白试验部分。膄游离抗体检测薀取小试管3支,分别标明A、B、O细胞,每管加患儿血清2滴,再分别加入3%-5%的A、B、O、反定型试剂红细胞悬液1滴。蒇37℃致敏1h后取出,若发生凝集,不必继续往下做。膅若不凝集,用盐水充分洗涤3次反应物后加入抗球蛋白血清1滴。1300g离心15s,轻轻悬浮细胞,肉眼观察凝集反应,记录结果。若肉眼不见凝集,以显微镜检查。按表一析结果。芆3、放散实验羂依据结果,采用合适的放散方法进行放散试验,具体操作执行《放散试验操作规程》,放散试验结果判断见表二袇患儿母亲血标本袆血型鉴定(执行《ABO和Rh(D)血型鉴定操作规程》)肃IgG抗-A(B)效价测定肀具体操作执行《IgG抗-A(B)效价测定规程》薀抗体筛选、鉴定试验薆具体操作执行《红细胞血型抗体筛选、鉴定操作规程》肄患儿父亲血标本蒃ABO和Rh(D)血型鉴定。罿具体操作执行《ABO和Rh(D)血型鉴定操作规程》莆五、根据表三,分析结果袂表一薁患儿血清中游离抗体检查结果意义荿指示红细胞肇羃意义虿AcBcOc袇+--肄-+-肂++-芈+/-+/-+薈---袂游离的抗-A膀游离的抗-B蚇游离的抗-A、抗-B或者抗-AB莈游离的ABO系统以外抗体袃无游离抗体薃表二莀患儿红细胞抗体释放试验意义螄指示红细胞羅蚁意义螀AcBcOc螂+--膂放散出IgG抗-A蝿-+-艿++-芅+/-+/-+螃---蚈放散出IgG抗-B肅放散出抗-AB,或同时放散出IgG抗-A或抗-B袅放散出ABO血型以外的抗体没