甘蓝型油菜谷胱甘肽过氧化物酶基因和非生物胁迫下的表达.pdf

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甘蓝型油菜谷胱甘肽过氧化物酶基因克隆和非生物胁迫下的表达中国油料作物学报甌甌油菜是世界四大油料作物之一,也是我国第一大油料作物,近五年来,我国年均种植面积和总产均胡茂龙,龙卫华,高建芹,陈新军,张洁夫,陈松,戚存扣,浦惠明’猧,,琋,,鹊—.—篟;;年,—帐∨┮悼蒲г壕米魑镅芯克矣土献魑锔牧贾行哪暇┓种行模漳暇摘要:利用—技术从甘蓝型油菜宁油号中克隆了一个非生物胁迫下细胞抵御活性氧琑撕Φ墓丶窯入赘孰墓趸锩基因,命名为登录号:目7旁亩量虺ざ任,推测编码蛋白含有霭被酸,分子量为.,等电点为妇哂蠫特有的鼋峁褂蚣鞍腚装彼岵谢Mü齈方法克隆得到基因组序列登录号:8眯蛄杏肽饽辖鍭蛳嗨疲个外显子和瞿诤幼槌桑诤拥募羟形坏惴险婧松颎狝嬖颉0攵縍狿发现在油菜茎、叶,角果和花中表达量高,根中表达量较低。在盐、干旱和高温胁迫下表达量升高,出现峰值的时间不同。该基因对低温胁迫没有响应。关键词:甘蓝型油菜;谷胱甘肽过氧化物酶;表达;非生物胁迫中图分类号:,.文献标识码:文章编号:———猦,—珻猣珻琂瓵籄醗猯琇猭,猰,猚,:.,...痑痚..—甊琹瑂琤,甀收稿日期:基金项目:国家科技支撵计划;江苏省科技支撑计划作者简介:胡茂龙,男,副研究员,博士,江苏泗阳人,从事油菜遗传与分子生物学研究。—:.∽..
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砌净蚩寺∮肷镄畔⒀Х治水稻嗍雀叩戎参镏新叫掷肓舜死嗷材料与方法中国油料作物学报,居世界第一⋯。然而,随着全球气候变化,一些不利的非生物逆境胁迫如干旱、高温、盐害、涝渍等对油菜的生长、发育和结实造成严重的不良影响,导致含油量下降、菜籽减产。研究认为逆境胁迫下体内油菜体内牟肭宄τ诙胶庾刺般不会伤害植物。但在逆境条件下平衡被打破,云浼康难趸允瓜赴ぶ趸鹕四系统和氧化细胞,使脂类和蛋白质代谢异常,最终对油菜生长、发育造成严重伤害。在长期进化过程中,植物形成了一套酶促和非酶促的宄评醋柚鼓ぶ趸苊馐艿珿敲复偾宄浦械墓丶咐啵ü呋的这种催化活性及编码基因的克隆研究最早起源于动物【源釉谝吧州尾蟹掷肓酥参锏个岳础轏,研究人员从柑桔燕麦、菠菜⑾蛉湛,陔襇础因。这类基因广泛参与植物非生物胁迫应答反应,其中番茄虻墓勘泶锘鼓芴岣转基因植株对盐、高温等非生物胁迫的耐受性¨引。研究模式植物拟南芥发现,基因组中共存在霰码幕~¨盝。除了尚绿体侍基质,、定位于细胞质,定位于线粒体,定位于内质网,嬖谟谙赴屎拖吡L逯小确⑾諥性降低,过量表达能显著增强转基因植株抗旱性,由此认为可作为清除酶或信号传递因子调节植物对透珊档挠Υ鸱从Α。。最近,韧ü匆寮际踅档鸵堵烫逯蠥虻谋泶锖螅;蛑仓甑目构庋趸财能力显著降低引。油菜和模式植物拟南芥同属十字花科,而油菜为十字花科芸薹属的重要油料作物。中分离到因—,对甘蓝型油菜蚩寺⊙究尚未报道。本研究从甘蓝型油菜中克隆了谷胱甘物胁迫下的表达进行了初步分析,以期为油菜抗逆甘蓝型油菜品种宁油号由江苏省农业科学院经济作物所提供。种子经%酒精消毒后,用蒸馏水冲洗椋炔ブ钟谟绮е校糜植物光照培养箱驧一。培养条件为℃/,光照时间庹涨慷4嗣缟ぶ—嬉镀冢H際胁迫处理;干旱胁迫用%芤号缛饔筒叶面及根部;湿害处理是将育苗钵浸泡至清水【#培养。分别于胁迫前、胁迫后、∫镀谝旱V兴俣常4嬗谝备用。组织特异性表达分析所用的开花期各个组织材料取自江苏省农业