实验报告课程名称:医学微生物学指导老师:________________成绩:__________________实验名称:细菌的分布、消毒和灭菌实验类型:_______________同组学生姓名:__________装订线实验目的了解细菌广泛分布于自然界及正常人体,树立“有菌观念”,从而认识无菌操作对于微生物学及医学实践的重要性。了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌,正常情况下不引起人类疾病,称为正常菌群。熟悉外界因素对细菌的影响,掌握常用的消毒和灭菌方法观察细菌鞭毛的变异熟悉生物因素对细菌的作用实验材料普通琼脂平板培养基、大肠杆菌肉汤培养液、枯草杆菌肉汤培养液、无菌毛细吸管、肉汤培养基管、电炉、锅子、高压灭菌器、接种环、酒精灯、紫外线灯、大肠杆菌培养物操作方法细菌的分布空气中的细菌(8人一组)取普通琼脂平板一个,打开盖暴露于空气中约15-30分钟,然后盖好,放37℃温箱孵育24小时后观察结果,计算有多少个菌落。手指皮肤上的细菌(8人一组)用手指直接涂于普通琼指平板上,放37℃温箱孵育,24小时后观察结果,记录有多少种不同特征的菌落。消毒和灭菌煮沸与高压灭菌法(2人一组)●菌液:大肠杆菌/枯草杆菌●甲组:煮沸(100℃,5min)●乙组:高压灭菌法(121℃,20min)●丙组:不作任何加热处理紫外线灭菌(8人一组)图1图1以灭菌接种环挑取大肠埃希菌培养物,于琼脂平板上作来回密集划线接种。半启皿盖(将皿盖遮住涂面的1/2),置于紫外线灯下lm以内接受照射30分钟。盖上皿盖,于37℃培养24小时后观察结果。抗生素的抗菌试验图2●菌株:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌1号、2号示教化学消毒剂对细菌的影响●%石炭酸图2迁徙生长(H)变形杆菌点状生长、单个菌落(O)实验结果细菌分布的实验结果表1细菌分布的实验结果检查材料空气手指细菌生长情况菌落个数平板培养基表面或多或少有菌落生长。培养基表面涂抹处有菌落生长。消毒和灭菌实验结果表2煮沸和高压灭菌实验结果细菌名称甲组100℃5分钟乙组121℃20分钟丙组未加热(对照)枯草芽胞杆菌混浊澄清混浊大肠埃希菌澄清澄清混浊紫外线灭菌结果平板上用皿盖遮盖部分的琼脂表面有灰白色菌苔生长,而未遮盖暴露于紫外线部分无菌生长。说明紫外线具有灭菌作用,但穿透力弱。化学消毒剂对细菌的影响实验结果表3化学消毒剂对细菌的影响化学消毒剂大肠埃希菌金黄色葡萄球菌抑菌圈直径(cm)敏感度抑菌圈直径(cm)敏感度1%﹢﹢﹢﹢﹢2%﹢﹢﹢﹢2%﹢﹢﹢﹢1:﹢﹢﹢﹢﹢%石炭酸培养基上变形杆菌只在点种处生长,而在普通培养基上变形杆菌呈迁徙性生长。结果分析细菌广泛分布于自然界及正常人体。高温对细菌有明显的致死作用,主要机制是凝固菌体蛋白质,也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌细胞膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。高压蒸气灭菌,因增加压力而提高沸点,灭菌效果最佳。有芽胞的细菌由于对热的抵抗力比无芽胞细菌强,所以只有采用高压蒸气灭菌法才能将芽胞彻底杀灭。本实验中大肠杆菌无芽孢结构,沸水即可杀灭,而枯草芽孢杆菌具芽孢结构,普通沸水杀不死芽孢,需要使用高压蒸汽灭菌。波长240nm~280nm的紫外线,因与DNA吸收光谱一致,而具有
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