维生素C的定量测定实验报告.doc

蒃生物化学实验报告羃维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)罿蒇一、实验目的袆莂掌握2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C的原理和方法蝿芄二、实验原理羄螂维生素C又称抗坏血酸。在1928年从牛的肾上腺皮质中提出的结晶物质,证明对治疗和预防坏血病有特殊功效,因此称为抗坏血酸。蒀莆还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚钠盐,本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,被还原后变为无色。肂因此,可用2,6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后,稍多加一些染料,使滴定液呈淡红色,即为终点。如无其他杂质干扰,样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量呈正比。芁芀三、实验器材蒇蒅1、松针、菜椒、大枣;蚀2、取液器羀3、容量瓶100ml芅4、微量滴定管5ml薃5、电子天平肀6、研钵、烧杯数只螁7、漏斗两个芆羅四、实验试剂螃膇1、2%草酸溶液:,溶于400ml蒸馏水中;莇2、1%草酸溶液:,溶于400ml蒸馏水中;肄3、标准抗坏血酸溶液;芃4、1%HCl;羈5、%2,6-二氯酚靛酚溶液。膅膂五、实验操作蚂蚈1、样品的提取膆松针:从南京大学教学楼前摘取的新鲜松针,用水清洗干净,吸去表面的水。,放在研钵中加入1%HCl溶液5ml一起研磨,研细。放置片刻,将提取液转入100ml容量瓶中,如此反复几次加入提取液。最后用1%HCl溶液定容,混匀,()静置10min,过滤,备用;薅菜椒和大枣:用水洗净,吸去表面水分。、。分别加2%草酸10ml于研钵中,研细,转移提取液于100ml容量瓶中并用2%草酸溶液定容。(这样,,)静置10min,过滤,弃去最初几毫升滤液,备用;肁2、滴定蒈标准抗坏血酸溶液:%草酸在100ml锥形瓶中,%2,6-二氯酚靛酚滴定至淡红色,并保持15s即终点;,放入100ml锥形瓶中,用与标准抗坏血酸溶液滴定相同的方法滴定;蚃蒁六、数据记录腿肅肅标准维生素C羀松针罿大枣肆菜椒膄2,6-二氯酚靛酚/、数据计算螃袂由标准液滴定数据求出1ml染料相当于多少mg抗坏血酸:袁T==:莁其中:100g样品中含抗坏血酸的质量;蚁滴定时所用去染料的体积数;袅每毫升染料能氧化抗坏血酸质量数,;芄10ml样液相当于含样品之质量数。螀松针:膇大枣:羆菜椒:莂膀八、实验讨论与注意事项袈羈1、维生素C是人体必需的营养素,其生理功能首先是作为酶的辅因子或辅助底物参与多种重要的生物合成过程,目前已知至少有8种酶保持高度活性需要维生素C。其次,维生素C作为抗氧化剂可清除O2-、OCl3-、OH-、NO-、NO2-等自由基,在保护DNA、蛋白质和膜结构免遭损伤方面起着重要作用。因为维生素C可以医治坏血病,因此又叫抗坏血酸