磷脂酶D制备及催化合成磷脂酰丝氨酸工艺研究.pdf

西北大学硕士学位论文磷脂酶D制备及催化合成磷脂酰丝氨酸工艺研究姓名:杨治彪申请学位级别:硕士专业:生物化工指导教师:,可催化磷脂酰基与其结合,形成新的磷脂,即磷脂酰基转移反应。磷脂酶惴捍嬖谟诟髦种参镏校诙锖臀⑸镏幸灿蟹植肌链霉菌进行自然选育得到了一株磷脂酶拷细叩牧疵咕源宋3龇⒕瓴用紫外诱变育种方法进行菌种改良,诱变筛选菌株的产磷脂酶盍μ岣ァ另外,对发酵制备的酶液进行初步的分离纯化处理,使得发酵液中磷脂酶幕通过研究磷脂酶呋铣闪字K堪彼峁ひ眨邮笛橹械贸隽嘶镜姆从乙醚相以的体积比混合,在奶跫陆涟璺从Γ字K堪彼岬氖章达%。同时,本文还对两相体系中磷脂酶拇呋从ΧρЫ辛顺醪窖芯浚确定了在磷脂酶谒挥谢嗵逑抵械姆从δP汀关键词字窪;磷脂酰基转移反应;磷脂酰丝氨酸;链霉菌;非水相催化反应:饬字系哪┒肆姿狨ゼ闪字岷汪腔衔铮当有另一本文以微生物链霉菌作为生产磷脂酶木郑⒔椭票噶字窪。通过对力提高了倍。条件:%..:...,%,,,琭.,瑆瑃簍。;;;猘杰丝学位论文作者签名:桶多是膨学位论文作者签名:描兰丝笸幽暾荚聄冶锣年∥月裟甓嘣拢跞西北大学学位论文知识产权声明书西北大学学位论文独创性声明本人完全了解西北大学关于收集、保存、使用学位论文的规定。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版。本人允许论文被查阅和借阅。本人授权西北大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所等机构将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》或其它相关数据库。保密论文待解密后适用本声明。指导教师签名:本人声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,本论文不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得西北大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。。⑾钟谏鲜兰推十年代,大量生物化学研究表明,其主要生理功能是参与细胞脂质代谢、信号转导及生物膜形成等,分布在从细菌到高等动植物的许多生物类群中【。近年来,利用磷脂酶募罨换环从μ匦越辛字男砸约爸票傅ヒ涣字拖∮辛字的研究取得重大进展。因此,磷脂酶难芯抗ぷ髟嚼丛绞艿饺嗣堑墓刈ⅰ磷脂酶闔和一渴状卧诤懿犯桶撞艘吨蟹⑾值模随后又相继在花生、蓖麻子、棉花子中发现。其后的大量研究表明,该酶广泛存在于动物、植物及各种微生物如酵母、细菌中。动物体内的磷脂酶饕7植荚脑、肝脏等组织中,有膜结合磷脂酶桶毫字窪两种】,但是大多数是和细胞膜结合的,难以进行大规模生产。一直以来,研究最多的是植物来源的磷脂酶渲饕7植荚谥参锏囊蹲印⒏椭肿拥绕鞴僦校⑺孀胖参锷し⒂淖变而变化。植物组织中的磷脂酶拷细撸蚁喽砸子谔崛『痛炕R虼耍目前工业化制备仍以植物组织绨撞艘蹲作为原料。为了扩大酶源,有许多国外学者研究了微生物磷脂酶7⑾钟攵参锢丛磷脂酶啾龋⑸锪字窪具有较强的底物耐受性,较宽的底物专一性和较高的碱基交换反应催化活性,更适合于工业应用。至今已报导的产磷脂酶奈生物主要有链霉菌、棒状杆菌、大肠杆菌、沙门氏杆菌以及假单孢菌等。其中,磷脂酶诹疵咕蟹植甲钗9惴海ǖ家沧疃唷在基因工程菌方面,【】,已取得一定进展,但还有很多问题亟待解决。目前,已从各种生物中克隆得到了颍鲈谥参锬饽辖嬷芯鸵丫啡狭龌磷脂酶纳砉δ磷脂酶拇呋灾因。根据这些基因的结构和它们编码的男蛄邢嗨菩浴⒂蚪峁埂⑸匦砸及克隆的顺序,把这些基因分成啵鮌、、、和在动物细胞中克隆到两个颍琍襂。在酵母中报告了两个对于磷脂酶纳砉δ埽昀从薪隙嗟难芯俊Q芯糠⑾至字窪与神经要包括:阿尔茨海默病、血管性痴呆、帕金森病、病、艾滋病所致神经病变、病以及药物和物理因素等所致痴呆。神经退行性疾病中神经细胞数目的减少主要是由凋亡引起的。细胞的凋亡中磷脂酶鹱疟;ば宰用,通过在细胞内过量的表达磷脂酶种朴晒劝彼嵫嗡盏嫉南赴蛲觯磷脂酶ü斡肟沟蛲龅男藕磐揪对谏窬赴目沟蛲鲋衅鹱胖匾5淖饔谩8血压病的发病机理可能与磷脂酶男藕抛5纪揪队泄亍4罅康难芯勘砻鳎谝些肿瘤的发生、分化、凋亡及转移等过程中磷脂酶缪菁渲匾5慕巧āK孀免疫学及分子生物学技术的发展,在不久的将来磷脂酶型晌V琢鲋瘟频陌在植物体内,有研究表明磷脂酶牍档姆⒂统墒煊泄亍緇浚字窪参与了膜磷脂的降解,引起膜完整性的丧失,最终导致果实