辅助降血糖功能评价辅助降血糖功能评价检测方法.ppt

第4章辅助降血糖功能评价第三节辅助降血糖功能评价实验检测方法延时符目录Contents02延时符一、动物实验(一)材料(二)实验方法(三)指标判定和结果判定二、人体试食试验(一)受试产品(二)试验方法(三)观察指标(四)结果判定03一、动物实验延时符(一)(C4H2N2O4·H2O,)或链脲佐菌素、地塞米松磷酸钠注射液、葡萄糖或医用淀粉、血糖测定试纸或试剂盒,胰岛素、甘油三酯、总胆固醇测定试剂盒。%、蔗糖15%、蛋黄粉15%、酪蛋白5%、%、%、%、%、%。、全自动生化仪、可见光分光光度计、酶标仪、天平。~5小时的血糖水平分组,随机选1个对照组和1个剂量组。对照组给予溶剂,剂量组给予高剂量浓度受试样品,连续30天,测空腹血糖值(禁食同实验前),比较两组动物血糖值。(二)(1)原理四氧嘧啶(或链脲霉素)是一种B细胞毒剂,可选择性地损伤多种动物的胰岛B细胞,造成胰岛素分泌低下,引起实验性糖尿病。(2)造模注射四氧嘧啶(用前新鲜配制)造模,小鼠45~50mg/kgBW·iv或125~130mg/kgBW·ip,大鼠50~80mg/kgBW·iv或120~160mg/kgBW·ip。5~7天后动物禁食3~5小时,测血糖,血糖值10~25mmol/L为高血糖模型成功动物。(二)实验方法04延时符(3)高血糖模型动物降空腹血糖实验1个模型对照组和3个剂量组()。剂量组给予不同浓度受试样品,模型对照组给予溶剂,连续30天,测空腹血糖值,比较各组动物血糖值及血糖下降百分率,(二)实验方法(4)高血糖模型动物糖耐量实验剂量组给予不同浓度受试样品,模型对照组给予同体积溶剂15~/kg~5g/kgBW,、2小时的血糖值或给医用淀粉后1、2小时的血糖值观察模型对照组与受试样品组给葡萄糖或医用淀粉后各时间点(0、、2小时)血糖值及血糖曲线下面积的变化04(二)实验方法方案二胰岛素抵抗糖\脂代谢紊乱模型(任选其一)(1)地塞米松诱导胰岛素抵抗糖\脂代谢紊乱模型①原理糖皮质激素具有拮抗胰岛素生物效应的作用,可抑制靶组织对葡萄糖的摄取和利用,促进蛋白质和脂肪的分解及糖异生作用,导致糖、脂代谢紊乱,胰岛素抵抗,诱发实验性糖尿病。04(二)实验方法②、2小时血糖值,作为该批次动物基础值。以0、,即1个空白对照组、1个模型对照组和3个剂量组,每组15只。空白对照组不做处理,3个剂量组灌胃给予不同浓度受试样品,模型对照组给予同体积溶剂,连续35天。各组给予维持料饲养,1周后模型对照组和3个剂量组更换高热能饲料,喂饲2周后,(%地塞米松注射量1ml/100g体重),每日1次,连续10~12天。实验结束,各组动物禁食3~4小时,检测空腹血糖、糖耐量、血清胰岛素及胆固醇、甘油三脂水平。04(二)实验方法