重组猪瘟病毒E2杆状病毒构建与在蚕蛹中表达重组猪瘟E2蛋白.pdf

摘要猪瘟殖乒诺渲砦粒砘袈一蚺分拗砦粒怯芍砦敛《靖腥疽鸬闹淼囊恢指度接触性热性传染病,它主要引起猪的实质器官出血及败血症,猪是唯一的自然宿主,包括驯养猪和野猪,任何年龄、品种、性别的猪和野猪均可发病。它传染性强、致病率高,给世界养猪业造成严重的经济损失,被国际兽疫局形狝类疾病。猪瘟病毒为单股正链《荆幸桓龃蟮目7⒃亩量,该开放读码框编码一个大约个氨基酸的多聚蛋白。这个多聚蛋白在病毒感染的宿主细胞内裂解成种病毒特异性蛋白质,其中治2《镜慕峁沟鞍祝种为非结构蛋白,/,,是具有免疫性质的痔堑鞍住芯恐な担珽鞍子盏嫉拿庖叻从ψ阋员;け幻疫猪抵抗的感染。家蚕养殖在我国是历史悠久的传统产业,发展新兴的生物制药产业是我国新阶段的目标之一,利用家蚕反应器表达蛋白旨在将我国的优势产业与不断发展的分子生物学技术紧密结合起来,不仅为开发高效广谱的猪瘟砸单位疫苗打下基础,同时可以探索利用家蚕生物反应器来表达蛋白节约成本,减少制药的技术难度。本研究旨在通过构建重组猪瘟病毒基因的杆状病毒在昆虫细胞和蚕蛹中表达重组猪瘟蛋白。根据羌堑闹砦镣没醵局男蛄猩杓埔铮ü齊狿方法扩增出的囊膜糖蛋白基因,镌诮胁庑蚣ê螅渲校锒訣/扩增产物命名为瓻锒訡疌┰霾锩狿—,锿过酶切后连接到供体质粒甌蚿载体上,.。》⑸刈榈陌咨菌落,∞.和.。利用—和等方法鉴定了两种重组病毒均能够在昆虫细胞中分泌表达。然后,,在一定时间内收获蚕蛹血淋巴,经觳猓峁砻髁街种刈椴《疽材芄辉诓嫌继迥诒泶镏刈橹砦敛毒蛋白。并根据商品化的试剂盒和猪瘟病毒蛋白标准品建立了重组猪瘟蛋白定量检测方法,为后续开发诊断试剂盒及亚单位疫苗过程中抗原的定量奠定基础。关键词:;蛋白;重组杆状病毒;分泌表达;蚕蛹;河南农业大学年硕士毕业论文—摘要
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.昀畂河南农业大学年硕士毕业论文一英文摘要甌籸,瑆,疎,/瓹琍...·,,...琣琒—.,.琤瓵·篊籈籹;.‘一——————————————————————————————————————————————————————
谢致实验过程中得到了传染病实验室王川庆教授、陈陆副教授的热情指导,你们时光荏苒,岁月如梭,转眼又离开母校的时节,回首三年读研时光,那些辛苦的、幸福的时刻历历在目。那些帮助我、引导我、激励我的老师,那些关心我、爱护我的朋友,我对你们表示由衷的谢意。在完成论文的过程之中,除了我自己三年来的潜心学习和研究之外,也凝聚了很多人的心血,在这里,我要对所有帮助过我的人表示真诚的感谢,祝福你们:生活快乐,身体健康,事业顺利,家庭和睦。生活因为你们变得更加美好。本文在导师张许科研究员的悉心指导和严格要求下完成。三年的研究生生活即将结束,在此,谨向我的导师表示最诚挚的感谢和崇高的敬意,感谢导师对我实验的指导和生活的关心。三年来,张老师渊博的学识、敏捷的思维、严谨的作风及对行业长远的眼光,深深影响了我,不仅培养了我对科研的兴趣和创新意识,更教会了我做人的道理和处事的方法,这都将是我终生受益的宝贵财富感谢康相涛院长在我学在我学习和思想认识上的悉心教导。感谢寄生虫实验室给我提供的良好科研氛围,与实验室老师和同学一年的朝夕相处使我对科研有了深刻的认识,感谢宁长申教授、张龙现教授、菅复春副教授对我的指导和帮助用渊博的知识为我指明了方向,在此对你们表示衷心的感谢感谢导师组邓瑞广研究员,王文泉教授、崔保安教授、张龙现教授、.郑杰研究员、陈红英副教授、陈陆副教授、杨明凡副教授等各位老师在完成学习任务和课题研究中对我的指导和帮助,在此致以诚挚的谢意。感谢国家兽药工程技术研究中心为我提供了良好的实验条件和浓厚的科研氛围,感谢白朝勇副教授,乔永岑高级工程师,荣骏弓研究员,伍锐所长,陶家权副所长、习向锋副所长等在课题的选择与设计、实验技术以及论文写作中所给予的指导和帮助。感谢中心研发小组刘武杰博士、逢文强博士、谭菲菲博士、王延辉硕士、王进产硕士、肖艳硕士、宋志光硕士等给我的帮助,特别要感谢庄金山硕士在试验过程中以及论文写作中给我的指导和帮助感谢研究生同学陈静、陈礼鹏、姜涛、王寅彪、张祥、梁鹏帅、解金辉、周永辉,朱丹、张学武、赵留涛、黄鹏、周博等,感谢师兄张家明、师兄左松、师河南农业大学年硕士毕业论文—致谢‘
弟苌生科和师弟闰果,在学习生活中我们像家人一样团结友好,你们是我的良师益友感谢我的家人对我学业的默默支持,感谢你们无私的付出最后再次感谢给予我帮助的老师、同学、朋友、亲人,我的学业完成离不开你们的辛勤劳动。感谢所有友好的人们
南鬃凼