Cyclin D1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及相关性.doc

Cyclin D1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及相关性
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:高绍芳李佃贵崔建从郭敏张纨
【摘要】目的探讨细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和抑癌基因PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及其相关性。方法应用免疫组织化学染色SP法检测Cyclin D1和PTEN在不同胃黏膜病变石蜡包埋标本的表达并进行相关性分析。结果在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、不典型增生和胃癌中Cyclin D1的表达率逐渐增高,PTEN的表达率逐渐降低,且差异有统计学意义();Cyclin D1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的阳性表达率呈负相关。结论 Cyclin D1、PTEN在胃癌的发生、发展中起协同作用,对其进行联合检测有助于胃癌的早期诊断。
【关键词】胃癌;胃癌前病变;CyclinD1;PTEN;相关性
胃癌(GC)是我国高发的恶性肿瘤之一,近年研究发现其形成是一个多因素、多阶段、多基因作用的复杂过程〔1,2〕。在各种致病因素作用下,胃黏膜在经历慢性浅表性胃炎(CSG)、萎缩性胃炎(CAG)、肠上皮化生(IM)、不典型增生(ATP)及GC的一系列贯序性形态学变化过程中,细胞趋向更为恶性的生物学行为。细胞周期调控基因在其发生发展过程中起着一定的作用,他们的表达失衡是导致胃癌发生的机制之一,故本研究采用免疫组化法探讨细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和抑癌基因(PTEN)在胃黏膜癌变多阶段中的表达及相关性,为研究胃癌发生机制及胃癌的早期诊断提供实验室依据。
1 材料与方法
研究对象选择河北医科大学中医院临床病理科保存的2004至
2008年胃窦部病理活检组织存档蜡块,共223例,其中CSG 35例,CAG(无IM)44例,CAG(伴IM)49例,ATG 45例,GC 50例。其中男108例,女116例。平均(±)岁。其中GC组织标本均未经放射治疗和(或)化学治疗。所用组织标本患者均签署知情同意书。
试剂与方法鼠抗人单克隆抗体Cyclin D1,鼠抗人单克隆抗体PTEN及免疫组化SP广谱超敏试剂盒(即用型)、DAB显色剂等均购自福州迈新生物技术开发公司。石蜡切片常规脱蜡、水化,进行水浴抗原修复,继以免疫组化试剂盒进行检测。操作步骤按说明书进行。以阳性片及PB代替一抗,设阳性及阴性对照。
免疫组化结果判定 Cyclin D1、PTEN阳性染色主要定位于细胞质中,为深浅不一的棕黄色颗粒,偶可见于细胞膜和(或)细胞核。每张切片由两位观察者随机选择5个有代表性的10×40高倍视野,计数网格自测微尺内阳性细胞数占视野总细胞数的百分比,并按阳性细胞数的百分比对各蛋白阳性表达的程度予以分级。阳性细胞5%为阴性(
);5%~25%为弱阳性(+);25%~50%为阳性();50%为强阳性()。
统计学方法采用线性趋势χ2检验进行各组间率的比较,应用Pearson四格表χ2检验进行相关样本的关联性分析。。
2 结果
Cyclin D1蛋白、PTEN蛋白在胃黏膜各病变中的表达随着胃黏膜癌变的阶段性进展,Cyclin D