稀释液配制操作规程.doc

稀释液配制操作规程
 
1、        配制稀释液的药品要求选用分析纯试剂,对含有结晶水的试剂要按摩尔浓度进行换算(如含水葡萄糖和无水葡萄糖);
2、        按稀释液配方,用称量纸、电子天平准确称量药品;
3、        按1000ml、2000ml剂量称量稀释粉,置于密封袋中;
4、        使用前将称量好的稀释粉溶于定量的双蒸水中,可用磁力搅拌器助其溶解;
5、        用滤纸过滤,以尽可能除去杂质;
6、        用1N稀盐酸或1N氢氧化钠调整BTS
(-)左右,渗透压为330mOsm;稀释液配好,应及时贴上标签,标明品名、配制日期和时间、经手人等;
7、        要认真检查已配制好的稀释液成品,发现问题及时纠正;
8、        液态状稀释液冰箱4℃保存,不超过24小时,超过有效贮存期的变质稀释液应废弃。
 
 
精液品质的检查操作规程
 
1、            精液量:以电子天平称量精液,按每克
1毫升计,避免以量筒等转移精液盛放容器的方法测量精液体积;
2、            颜色:正常的精液是乳白色或浅灰白,精子密度越高,色泽愈浓,其透明度愈低。如带有绿色或黄色是混有脓液或尿液,若带有淡红色或红褐色是含有血液。这样的精液应舍弃不用,会同兽医寻找原因;
3、            气味:猪精液略带腥味,如有异常气味,应废弃;
4、            pH值(酸碱度):以PH计测量(PH计使用见说明书);
5、            精子活率检查:活率是指呈直线运动的精子百分率,在显微镜下观察精子活率,一般按
- 的十级评分法进行,;
6、            精子密度:指每毫升精液中所含的精子数,是确定稀释倍数的重要指标。要求用血细胞计数板进行计数或精液密度仪测定。血细胞计数板计数方法:①以微量加样品取具有代表性原精液100μl,3%NaCl 900μl,混匀,使之稀释10倍;②在血细胞计数室上放一盖玻片,取1滴上述精液放入计数板的槽中,靠虹吸将精液吸入计数室内;③在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数,将该数乘以50万,即得原精液每毫升的精子数(即精液密度)。精液密度仪使用见其说明书;
7、            精子畸形率:畸形率是指异常精子的百分率,一般要求畸形率不超过18%,其测定可用普通显微镜,但需伊红或姬姆沙染色,相差显微镜可直接观察活精子的畸形率,公猪使用过频或高温环境会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子;畸形精子种类很多,如:巨型精子、短小精子、双头或双尾精子,顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或与尾部分离、尾部变曲。要求每头公猪每两周检查一次精子畸形率;
8、            按要求做好精液品质检查登记表;
9、            实事求是地填写种公猪健康状况登记表,从而真实地反应种公猪健康状况。
 
 
精液的稀释操作规程
 
1、  精液采集后应尽快稀释,原精贮存不超过30分钟;
2、  未经品质检查或检查不合格()的精液不能稀释;
3、  稀释液与精液要求等温稀释,两者温差不超过1℃,即稀释液应加热至33℃-37℃,以精液温度为标准,来调节稀释液的温度,绝不能反过来操作;
4、  稀释时,将稀释液沿盛精液的杯(瓶)壁缓慢加入到精液中,然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒搅拌,使之混合均匀;
5、  如作高倍稀释时,应进行低倍稀释(1:1-2),稍待片刻后再将余下的稀释液沿壁缓慢加入,以防造成“稀释打击”;
6、  稀释倍数的确定:活率≥,一般按每个输精剂量含40亿个总精子,输精量为80-90ml确定稀释倍数,例如: 某头公猪一次采精量是200ml ,,密度为2亿/ ml,要求每个输精剂量是含40亿精子,输精量为80ml,则总精子数为200ml×2亿/ml=400亿,输精头份为400亿÷40亿=10份,加入稀释液的量为10×80ml-200ml=600ml;
7、  稀释后要求静置片刻再作精子活力检查,如果稀释前后活力一样,即可进行分装与保存,如果活力下降,说明稀释液的配制或稀释操作有问题
,不宜使用,并应查明原因加以改进;
8、  不准随便更改各种稀释液配方的成分及其相互比例,也不准几种不同配方稀释液随意混合使用;
9、  稀释液的配方见附表。
 
精液的常温保存的操作规程
 
1、          精液稀释后,检查精液活率,若无明显下降,按每头份80-90 ml分装;
2、          瓶上加盖密封,并在输精瓶上写清楚公猪的品种、耳号,采