实验二 槐米中芦丁的提取和芦丁水解制备槲皮素.doc

实验二槐米中芦丁的提取和芦丁水解制备槲皮素一、概述植物来源:槐米系豆科植物槐树(sophorajaponicaL.)的花蕾(槐米),芦丁含量高达12%~20%。荞麦中含量也较高。含芦丁成分的植物高达70种以上。功效:芦丁经药理实验证明具有调节毛细血管渗透作用,具有维生素P样作用。在临床上用作毛细血管止血药,常作为高血压病的辅助用药。芦丁为槐米中主要有效成分。主要化学成分的结构及理化性质:芦丁(Rutin)也称芸香苷,是槲皮素3位上的羟基与芸香糖脱水缩合形成的苷(芸香糖为葡萄糖与鼠李糖组成的双糖)。分子式:C27H30O16·3H2O,淡黄色针状结晶,含三分子结晶水,熔点174~178℃,无水物为188~190℃。易溶于碱液,显橙黄色,酸化后又析出。在冷水中的溶解度为1:10000,热水中为1:200,在冷乙醇中为1:650,在热乙醇中为1:60,在吡啶中为1:12。微溶于乙酸乙酯和丙酮,难溶于苯、三氯甲烷、石油醚等极性小有机溶剂,可溶于硫酸和盐酸,加水稀释又可析出。UV:259,299,359nm。芦丁用20%H2SO4水溶液水解可得槲皮素(芦丁的苷元),呈黄色结晶,313~314℃,C15H10O7·2H2O,在热乙醇中溶解度为1:23,冷乙醇中1:290,难溶于水和苯等极性小的有机溶剂,可溶于极性较大的有机溶剂如甲醇、乙酸乙酯、丙酮等。UV:255,269sh,301sh,370nm。其他成分理化性质:皂苷(saponin)粗品为白色粉末,~220℃。易溶于吡啶。能溶于200倍的甲醇,酸水解后获得两种苷元(白桦酯醇、槐花二醇)及糖(糖为葡萄糖,葡萄糖醛酸和葡萄糖醛酸内酯)。白桦酯醇(betulin)无色针晶,~217℃,能溶于醋酸、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、三氯甲烷、苯等;难溶于石油醚。槐花二醇(Sophoradiol)无色针晶,~220℃或224℃,溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇,难溶于水。芦丁和槲皮素结构式如下所示。 (含三分子水)(含二分子水)实验部分(一)实验目的要求制备芦丁,供药用。通过芦丁的制备,掌握黄酮类化合物的提取分离的原理和操作。掌握黄酮苷水解制备黄酮苷元的方法。熟悉重结晶技巧。了解和掌握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。(二)实验的基本原理芦丁的提取原理利用芦丁结构中含有多个酚羟基,呈酚酸性,能在碱水中溶解的性质,可用碱性溶剂进行提取,提取液加酸后可沉淀析出(碱溶酸沉法)。也可利用芦丁在冷水中溶解度小,在热水中溶解度大的性质进行提取。,在热乙醇中溶解度大,以及在热水中溶解度大,在冷水中溶解度小,芦丁用溶剂加热溶解后,趁热抽滤,滤液放冷后就能析出而达到分离的目的(如不纯可再重复操作进行分离)。也可采用醇-水法进行精制。3. 芦丁的鉴定原理(1)利用吸附薄层色谱的分离原理,芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开,显色,以达到鉴定芦丁的目的。(2)通过专属的化学显色反应,确定芦丁的成分类型(黄酮类)。(三) 实验内容1. 用酸碱法、水提法、醇提法提取槐米中芦丁。2. 在酸性条件下加热回流水解芦丁,制备槲皮素。3. 溶剂重结晶纯化芦丁和槲皮素。4. 薄层色谱法和显色反应鉴定芦丁和槲皮素(四)实验药材仪器与试剂1.