《生物药剂学与药代动力学实验》实验三 家兔头孢呋辛酯头孢呋辛钠单次给药药代动力学研究（样本测定）.ppt

实验三家兔头孢呋辛酯/头孢呋辛钠单次给药药代动力学研究(样本测定)。(HPLC)的操作方法和注意事项。、重现性。实验原理生物样品分析质量的保证应在生物样品分析方法验证完成之后开始测试未知样品。每个未知样品一般测定一次,必要时可进行复测。药代动力学比较试验中,来自同一个体的生物样品最好在同一分析批中测定。每个分析批应建立标准曲线,随行测定高、中、低3个浓度的质控样品,每个浓度至少双样本,并应均匀分布在未知样品测试顺序中。当一个分析批中未知样品数目较多时,应增加各浓度质控样品数,使质控样品数大于未知样品总数的5%。质控样品测定结果的偏差一般应小于15%,最多允许1/3质控样品的结果超限,但不能在同一浓度中出现。浓度高于定量上限的样品,应采用相应的空白基质稀释后重新测定。对于浓度低于定量下限的样品,在进行药代动力学分析时,在达到Cmax以前取样的样品应以零值计算,在达到Cmax以后取样的样品应以无法定量(Notdetectable,ND)计算,以减小零值对AUC计算的影响。(已配制)精密称取对乙酰氨基酚15mg,加入溶液10mL(甲醇:水=1:1)溶解,,放4℃冰箱储存。取对乙酰氨基酚储备液100μL,加入溶液900μL(甲醇:水=1:1),得浓度为150μg/mL的内标液。(1)待血样(100μL)完全解冻后,加入乙酰氨基酚内标液(150μg/mL)10μL,涡旋10s混匀。(2)加入甲醇300μL,涡旋1min,静置3min。(3)12000rpm离心5min,取上清液200μL常温真空干燥1~2小时。(4)待溶剂挥干后,加入100μL甲醇水溶液(水:甲醇=8:2)溶解,涡旋1min,12000rpm离心5min。(5)取上清液60μL至有内趁管的进样瓶(需检查内趁管底部是否有气泡,否则底部有气泡影响进样,有气泡需甩一下),进样20μL。::甲醇梯度洗脱,设置如下:检测波长:271nm实验操作时间(min):甲醇0-690:106-1275:2512-1590:(1)分别记录各时间点待测物及内标峰的面积。(2)将其代入标准曲线中(实验一)计算浓度。(3)参数计算:采用非房室模型计算主要的药代动力学参数,参见实验四。(甲醇)的安全使用。,以免药物分布不均匀。,注意对EP管进行编号,避免不同时间点的样品混淆。(仅10μL),需加到液面以下并每次更换枪头,避免样品之间的污染。空白样本不加内标。:箱门关上,并关闭放气阀,开启真空阀,接通真空泵电源开始抽气;使用结束,应先关闭真空阀,再关闭真空泵电源,最后开启放气阀。,请确认是271nm波长检测的数据方可拷贝。:下下周二(6月6日),并将原始数据及该Excel文件于下下周六(6月10日)前由班长或学委统一发送至******@.(钟老师)******@.(李老师)单个文件命名方式“动物实验时间+组号”比如“20170516A”注意事项