气相色谱法测定药物中有机溶剂残留量.ppt

气相色谱法测定药物中有机溶剂残留量课程:药品检验技术一实验目的掌握内标法、外标法计算杂质含量。熟悉气相色谱-氢火焰离子化检测器法(GC-FID)测定原料药中残留有机溶剂的方法。熟悉气相色谱仪的工作原理和操作方法。了解顶空气相色谱仪的作用原理。仪器:气相色谱仪(弱极性或中等极性气相色谱柱,1~5μL微量注射器)试药:(1)色谱条件 色谱柱:3%OV-17玻璃柱,柱长2m,内径3mm;检测器:FID;柱温:50℃;气化室温度:120℃;检测器温度:140℃;载气:N2;流速:30mL/min;空气:;灵敏度:102;进样量:2μL。三操作方法(2)溶液制备与测定 精密量取甲醇10µL()与丙酮100µL(相当于79mg),置100mL量瓶中,%(mL/mL)正丙醇(内标物质)溶液20mL,加水稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液;,精密称定,置10mL量瓶中,精密加入上述内标溶液2mL,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。取上述溶液,照气相色谱法,按正丙醇计算的理论板数应大于700。%(g/g),并不得出现甲醇峰。(3)计算 按下式计算定量校正因子(f)和检品中丙酮的含量(g/g)、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷(1)色谱条件色谱柱:HP-5毛细管柱(5%phenylmethylsiloxane,30m×);柱温:45℃;气化室温度:180℃;检测室温度:200℃(FID);氢气流速:40mL·min-1;空气:450mL·min-1,氮气:1mL·min-1;分流比:3׃1;样品液:90℃,加热10min,(自动)顶空进样。三操作方法(2)溶液制备(ⅰ)取甲醇100μL,乙腈30μL,二氯甲烷10μL,三氯甲烷10μL,分别加无有机物的水至100mL,作为定位溶液。(ⅱ)另取上述同样量有机溶剂,混合,,作为有机残留溶剂的限度试验对照溶液。取1mL对照溶液,,测定有机溶剂的检测限。(ⅲ),精密称定,[如果样品在水中不溶,可用适当浓度的二甲基甲酰胺(DMF)水溶液溶解样品],作为供试品溶液。三操作方法(3)分离度与系统适用性试验 取定位溶液在上述色谱条件下测定,记录色谱图和保留时间。取对照溶液重复进样,计算各成分峰的分离度、柱效及色谱峰面积的相对标准差。另取对照溶液的稀释溶液进样,计算药物中各有机溶剂的检测限。参照下列表格式记录各色谱参数:有机溶剂T(min)峰面积(重复进样)123RSD100%柱效n分离度R检测限溶液峰面积甲醇乙腈二氯甲烷三氯甲烷(4)样品测定 取供试品溶液,在上述色谱条件下进样,记录色谱图,外标法计算含量。:在分离度达到要求的情况下尽可能选择低的柱温。开机时,要先通载气,再升高气化室、检测室温度和分析柱温度,为使检测室温度始终高于分析柱温度,可先加热检测室,待检测室温度升至近设定温度时再升高分析柱温度;关机前须先降温,待柱温降至50℃以下时,才可停止通载气、关机。:为获得较好的精密度和色谱峰形状,进样时速度要快而果断,并且每次进样速度、留针时间应保持一致。:为避免被测物冷凝在检测器上而污染检测器,检测器的温度必须高于柱温30℃,并不得低于100℃。FID点火时应关小空气流量和开大H2流量,待点燃后,慢慢调整到工作比例,一般空气与H2的流量比为10:1,载气(N2)与H2的流量比为1:1~1:。用峰高定量时,需保持载气流速恒定。