环境卫生微生物检验.docx

--------------------------校验:_____________-----------------------日期:_____________环境卫生微生物检验第九章环境卫生微生物检验第一节化妆品微生物检验化妆品是指以涂擦、喷洒或者其他类似的方法,散布于人体表面任何部位(皮肤、毛发、支架、口唇等),以达到清洁、消除不良气味、护肤、美容和修饰目的的日用化学工业产品。在正常以及合理的、可预见的使用条件下,化妆品不得对人体健康产生危害。化妆品的微生物学质量应符合下列规定:眼部化妆品及口唇等黏膜用化妆品以及婴儿和儿童用化妆品菌落总数不得>500CFU/mL或500CFU/g。其他化妆品菌落总数不得>1000CFU/mL或1000CFU/g。每克或每毫升产品中不得检出粪大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。化妆品中霉菌和酵母菌总数不得>100CFU/mL或100CFU/g。化妆品的直接接触容器材料必须无毒,不得含有或释放可能对使用者造成危害的有毒物质。一、样品的采集及注意事项1、所采集的样品,应具有代表性,一般视每批化妆品数量大小,随机抽取相应数量的包装单位。检验时,应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量<20g的样品,采集量可以适当增加,其总量应>16g。2、供检验样品,应严格保持原有的包装状态。进口产品应为市售包装。容器不应有破裂,在检验前不得打开,防止样品被污染。3、接到样品后,应立即等级,编写检验序号,并按检验要求尽快检验。如不能及时检验,样品应放在室温音量干燥处,不要冷藏或冷冻。4、若只有一个样品而同时需做多种分析,如细菌、毒理、化学等,应先做微生物检验,再将剩余样品做其他分析。5、在检验过程中,从打开包装到全部检验操作结束,均需防止微生物的在污染和扩散,所用采样用具、器皿及材料均应事先灭菌,全部操作应先在无菌室内进行,或在相应条件下,按无菌操作规定进行。6、若检出粪大肠菌群或其他致病菌,自报告发出之日起该菌种及备检样品应保存一个月。二、供检样品的制备(一)液体样品1、水溶性的液体样品可量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中,如样品少于10mL,仍按10倍稀释法进行。如为5mL则加到45mL灭菌生理盐水中,混匀后,制成1:10检液。2、油性液体样品取样品10mL,先加到5mL灭菌液状石蜡混匀,再加10mL灭菌的吐温80,在40~44℃水浴中振荡混合10分钟,加入灭菌生理盐水75mL(在40~44℃水浴中预温),在40~44℃水浴中乳化,制成1:10的悬液。(二)膏、霜、乳剂半固体状样品1、亲水性样品称取10g,加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中,充分振荡混匀,静置15分钟。用其上清液作为1:10检液。2、疏水性样品称取10g,放到灭菌的研钵中,加10mL灭菌液状石蜡,研磨成黏稠状,再加入10mL灭菌吐温80,研磨待溶解后,加70mL灭菌生理盐水,在40~44℃水浴中充分混合,制成1:10检液。(三)固体样品称取10g,加到90mL灭菌生理盐水中,充分振荡混匀,使其分散混悬,静置后,取上清液作为1:10检液。如有均质器,上述水溶性膏、霜、粉剂等,可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水,均质1~2分钟;疏水性膏、霜及眉笔、唇膏等,称10g样品,加10mL灭菌液状石蜡,10mL灭菌吐温80,70mL灭菌生理盐水均质3~5分钟。三、化妆品微生物指标检验方法(一)菌落总数菌落总数(aerobicbacterialcount)是指化妆品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度、培养时间、pH、需氧性质等),1g(1mL)检样中所含菌落的总数。所得结果只包含一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。测定菌落总数便于判明样品杯细菌污染的程度,是对样品进行卫生学总评价的综合依据。1、检验步骤(1)用灭菌吸管吸取1:10稀释的检液2mL,分别注入到两个灭菌平皿内,每皿1mL。另取1mL注入到9mL灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面),更换一支吸管,并充分混匀,制成1:100检液。吸取2mL,分别注入到两个灭菌平皿内,每皿1mL。如样品含菌量高,还可再稀释成1:1000、1:10000、……,每种稀释度更换一支吸管。(2)将融化并冷至45~50℃的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内,每皿约15mL,随即转动平皿,使样品与培养基充分混合均匀,待琼脂凝固后,翻转平民,置36±1℃培养箱内培养48±2小时。另取一个不加样品的灭菌空平皿,加入约15mL卵磷脂吐温80营养琼脂培养基,待琼脂凝固后,翻转平皿,置36±1℃培养箱内培养48±2小时,为空白对照。(3)为便于区别化妆品中的颗粒与菌落,%的TTC溶液,如