血细胞分析仪.docx

血细胞分析仪.docx深圳大学实验报告课程名称:体外诊断仪器原理与实践实验项目名称:血细胞分析仪学院:专业:医学院医疗器械工程指导教师 报告人 学号 班级: 实验时间: 2014・05・09 实验报告提交时间: 教务部制实验目的与要求:介绍血细胞分析仪的计数原理、血红蛋门浓度测定原理。记录血细胞分析仪的测试流程。3•简单分析血细胞分析仪检测报告中白细胞、红细胞、血小板以及白细胞分类的意义。方法、步骤:实验仪器:三分类血细胞分析仪:一、简要操作指南及注意事项1、 开机前的准备检查试剂是否足量,有无浑浊变质,试剂管道有无扭结,并倒空废液瓶2、 开机打开机器后部的开关,等待机器自动冲洗内部管路后,自动测量本底并岀现计数界面3、 本底检查出现计数界面后,机器将自动测量的本底数值显示在屏幕上,本底结果要求:,仪器将会提不“木底异常”请执行清洗或维护程序4、 全血测量在计数界面下,按[模式]键,将模式设置为“全血”混匀抗凝血后,送到采样针下,让采样针插入抗凝血按开始键,开始对样本计数二、三分类血细胞分析仪原理和主要结构及其参数意义:所谓三分类是把白细胞分成大中小,测量方法是基于库尔特原理..计数原理■■库尔特原理:库尔特原理也叫电阻抗法,其主要原理是依据电解质溶液屮悬浮颗粒在通过计数小孔时,引起电阻变化,在恒流电路中,电阻的变化引起电压的变化来进行细胞计数和体积测定的。如图1所示,将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液倒入一个不导电的容器中,再将镶有宝石小孔的管子插入到细胞悬液屮,在小孔管内侧充满稀释液,并在其内外各證一个电极。当细胞通过小孔时,由于血细胞具有非传导性的性质,因此,将引起内、外电极间的电阻增加,产生一个脉冲。若在两电极间加上一个恒流源,则这个电阻的变化就转换成了电压的变化。脉冲变化的次数代表血细胞通过小孔的个数,其脉冲的高度表征细胞体积的大小。 细胞计数原理综上可知:、小孔竹、内外电极等组成。英中,小孔管(主要是红宝石孔)下图是整个测虽系统的主要部分,它决定了血球分析仪的测量准确度。小孔越小(人概100U米那样),测量准确度越高,但易造成堵孔;小孔越大,测量准确度越低,但不易堵孔。目而市场上销售的利用电阻抗法设计的血球分析仪的竞争焦点就在于把小孔做得小而不易堵孔,为了实现细胞逐个通过可采用鞘流法,根据两侧鞘流的流速不同使细胞一个个的进入孔内从而不造成堵孔和细胞并排进入的谋差的问题(如下图):其排堵方法大致有反冲法和电灼烧法两种,或二者兼而有Z。测量系统得到的电平信号经放大、阈值调节、甄别、整形后进行计数,得到RBC、WBC、PLT的数量。但三者的计数原理乂略有不同。口细胞计数时,机内微型计算机按体积大小将口细胞从3()〜45fl分为256个通道,每个通道为1164fl0根据细胞人小被分别放在不同的通道中得到白细胞体积的直方图,根据体积大小可分为不同的细胞群,第一群主要是淋巴细胞,第二群主耍是单核细胞,第三群为粒细胞,这就是“三分群法”也就是常说的三分类。红细胞计数原理同白细胞计数原理大致相同。在红细胞计数的同时,把各脉冲幅度相加,得到红细胞的总体积,经计算得到红细胞的平均体积。血红蛋白的测屋通常用比色法得到。红细胞的平均体积(MCV),红细胞平均血红蛋白含虽:(MCH),平均血红蛋白浓度(MCHC),红细胞体枳分布宽度(RDW)都是通过计算得來的。血小板计数时,微型计算机按体积分成64个通道,范围为2〜28fl之间,血小板的平均体积(MPV)-朗伯比尔定律在仪器的内部,当仪器把血液样本吸进来的时候会分成两个杯子(通道)。一个是测量红细胞和血小板的(因为红细胞和血小板的体积比较容易根据信号强度区分,白细胞造成的影响可以忽略因为红细胞的数量比较大)。另外一个杯子是测量血红蛋白和白细胞的,白细胞依然使用库尔特原理计数,而血红蛋白的测定我们知道红细胞通过溶血素可以使红细胞破裂释放血红蛋口出來,然后其与溶血剂结合形成血红蛋白衍牛物,进入血红蛋白测试系统,在特定波长(一般在53()〜55()nm)下比色,吸光度的变化与液体屮Hb含虽成比例,仪器便可显示Hb浓度。不同系列的血液分析仪配套溶血剂配方不同,形成的血红蛋白衍生物也不同,但大多数的最大吸收光谱接近540nm,所以血红蛋白的含量用朗伯比尔定律可以将测得的吸光度换算成浓度。A=KCL其中A是吸光度无单位K是摩尔吸光系数单位L/(MOL*CM)C是物质的浓度单位MOL/LL是光径单位是CM山于A可以测定K已知L已知从而可以计算岀C。达到测量的目的。左图是机器的内部局部结构图,核心的是