余甘子提取物对小鼠免疫功能的影响.doc

余甘子提取物对小鼠免疫功能的影响作者:崔炳权~何震宇~杨泽民~林元藻【摘要】目的探讨余甘子对小鼠免疫功能的影响。方法用不同剂量余甘子提取物给正常小鼠连续灌胃,检测血清溶血素含量、腹腔巨噬细胞吞噬功能、迟发型变态反应、T淋巴细胞增殖和NK细胞活性。结果余甘子提取物能增加小鼠血清溶血素含量、明显增强小鼠巨噬细胞吞噬功能、改善迟发型变态反应~促进T淋巴细胞增殖~提高NK细胞活性。结论余甘子能显著增强小鼠免疫功能。【关键词】余甘子;免疫功能;溶血素;T淋巴细胞;巨噬细胞;NK细胞;、油甘子、余甘果等~为大戟科叶下珠属植物余甘子的成熟果实~广泛分布在广东、福建、台湾、贵州、湖南、广西、四川、浙江和云南等省区。余甘子果入药~中医学认为~余甘子性味甘、酸、涩、凉,归肺、胃经。其功能与主治为清热凉血~消炎,消食健胃,生津止咳;用于血热血瘀、消化不良、腹胀、咳嗽、喉痛及口干[1]。明《本草纲目》曾记载:“余甘子果~主补益气~久服轻身~延年益寿”。余甘子的药理作用的研究报道很少~为了探讨余甘子的抗肿瘤作用~本实验研究了余甘子提取物对小鼠免疫功能影响~旨在了解余甘子的免疫药理作用机制~为研究其抗肿瘤机制提供研究资料~为余甘子的食用和药用价值的开发提供实验依据。、药品与试剂余甘子采购自四川盐源县。。余甘子提取物制备:将余甘子晾干~取适量余甘子~常规水煎2次~过滤后混合并浓缩成1g生药/ml~4?保存备用。2~4二硝基氟苯(DNFB)~二甲基亚砜(DMSO)~上海试剂一厂产品。RPMI-1640~MTT~PHA~Sigma产品。721型分光光度计~CO2培养箱~酶标仪~离心机。~雌雄兼用~体质量为(20〒2)g~由广州市白云区穗北实验动物养殖场提供。[2]:小鼠40只,体质量(20〒2)g~随机分为4组~每组10只。空白对照组~;试药大剂量组、中剂量组、小剂量组~每只每天分别灌胃余甘子提取物45,30,15mg/kg~连续12d。给药第2天~每只小鼠腹腔注射5%~末次给药后禁食24h~断头取血并分离血清~将血清用生理盐水按1?50稀释~取血清1ml~加5%~37?水浴10min~冰浴~离心,取上清液1ml~测定A540~计算样品的半数溶血值(HC50)。用HC50代表血清溶血素水平。[3]小鼠40只~分组及给药天数和剂量同实验“”项。第12天小鼠称重~后腹腔注射5%淀粉肉汤1ml~致敏24h后~腹腔注射1ml5%鸡红细胞悬液~4h后脱臼处死~腹腔注入5ml冷Hanks液~按摩腹部5min后~解剖~无菌吸取腹腔液涂片~晾干~甲醇固定5min~瑞-姬氏复合染色剂染色~镜检~在油镜下观察~随机计数100个吞噬细胞中吞噬鸡红细胞及吞噬的鸡红细胞总数~并计算巨噬细胞吞噬百分率与吞噬指数。