猪树突状细胞的体外扩增.doc

猪树突状细胞的体外扩增猪树突状细胞的体外扩增第3l卷第4期淮北煤炭师范学院(自然科学版)(NaturalScience),曹曼丽,王贝贝(淮北师范大学生命科学学院,安徽淮北235000)摘要:树突状细胞(DC)是一类专职的抗原提呈细胞,在激发机体初始免疫反应和调节T细胞介导的免疫反应中都发挥十分重要的作用,,分别加入150ng/mLCSF和100U/mLpIL一4,体外培养6d后诱导出大量DC,通过显微镜观察pGM—可见其细胞表面具有典型的树突状突起,:猪;树突状细胞;培养;体外中图分类号:S828文献标识码:A文章编号:1672—7177(2olo)o4—0041—03随着畜牧业快速发展,各种病毒性传染病每年给养猪业带来巨大的经济损失,(ells,DC)(antigenpresentingcells,APC),髓够捕获,加工处理抗原,并递呈给T细胞,启动初始T细胞反应n].DC也可以作为一种"活的佐剂",,经过一些细胞因子刺激培养后可以分化为DCt,,在猪粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(—macrophagecolonystimulatingfactor,pGM—CSF)和猪白细胞介素4(porcineinterleukin一4,plL一4)的共同刺激下培养6d,—CSF,pIL一4,淋巴细胞分离液(Fieoll,)(dulbeeeo8modi—fledeaglemedium)完全培养基包括:无酚红DMEM培养基(Gibco公司),100mL/L灭活的胎牛血清(Gibco公司),100U/mL青霉素,100lxg/—4月龄无特异性病原体(specificpathogenfree,SPF)猪的外周血,———乙二胺四乙酸(etraaceticacid,EDTA),再加入等体积无菌磷酸盐缓冲液(phosphatebuffersaline,PBS)(),滴加到淋巴细胞分离液上层,室温2000r/min离心15rain,吸出界面细胞,用PBS洗涤两次,DMEM完全培养基悬浮细胞,加入到24孔板中,每孔2×10细胞/mL培养基,37?50mL/LCO温箱中培养16h后弃去培养基,DMEM完全培养基轻轻冲洗培养板一次,吸去非贴壁细胞,即获得贴壁的单