2012,28(4)中国人兽共患病学报ChineseJournalofZoonoses367文章编号:1002—2694(2012)04—0367—04尖吻蝮蛇舌形虫若虫粗抗原诊断效果及组分分析*张玲玲,陈家旭,陈韶红,蔡玉春,郭俭摘要:目的分析尖吻蝮蛇舌形虫若虫粗抗原的蛋白组成、免疫特性及在舌形虫病诊断中的诊断效果。方法自感染尖吻蝮蛇舌形虫虫卵4个月的小鼠体内取尖吻蝮蛇舌形虫若虫,匀浆,用盐析法制备抗原。以此粗制抗原包被微量反应板,用1'7接EIISA方法检测尖吻蝮蛇舌形虫病人、感染小鼠及其它寄生虫病人血清中的特异性IgG抗体。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(WesternBlot)技术分析该粗制抗原的有效抗原蛋白组分。结果ElISA方法检测尖吻蝮蛇舌形虫病人血清5份,正常人血清17份,感染小鼠、血吸虫病、肺吸虫病、肝吸虫病、囊虫病、旋毛虫病病人血清各2O份,蛔虫病、钩虫病、鞭虫病病人血清各lO份,发现舌形虫病人和感染小鼠血清均为阳性,其它寄生虫病人血清均为阴性经SDS-PAGE和WesternBlot分析,尖吻蝮蛇舌形虫成虫粗抗原可见5条主带和14条次带(Mr16-200kDa);若虫粗抗原可见9条主带和13条次带(Mr16—150kDa),其中有16条特异性条带可被感染小鼠血清识别,5条特异性条带可被舌形虫病人血清识别,与肺吸虫病、鞭虫病病人血清在约M34kDa附近处出现较徽弱的交叉反应带,同其它寄生虫病人血清未出现交叉反应带。结论尖吻蝮蛇舌形虫若虫粗抗原同其它寄生虫病的交叉反应较小,可用于尖吻蝮蛇舌形虫病的血清学检测,而其有效的诊断抗原成分需经纯化后再行进一步的分析。关键词:舌形虫病;尖吻蝮蛇舌形虫;粗抗原;E1ISA;WesternBlot中图分类号:R3849文献标识码:ADiagnosticeffectsandfractionofcrudeantigensfromArmillifergff,.DdD,lffnymphsZHANGLing—ling,CHENJia—xu,CHENShao—hong,CAIYu—chun,GUOJian(NationalInstituteofParasiticDiseases,Chines'eCenterfoDiseaseControlandPrevention,LaboratoryofParasiteandVectorBiology,MinistryofHealth,WHOCollaboratingCenterforMalaria,SchistosomiasisandFilariasis,Shanghai200025,China)ABSTRACT:—dontisnymphswerecollectedfromthemiceon120dayspost—,theyweremanuallyho—mogenizedbyusingagl
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