实验二++槐花米中芦丁的提取与检识.doc.doc

、,掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理和操作。。二、主要化学成分的结构及性质芦丁(Rutin)广泛存在于植物界中,现发现芦丁的植物至少在70种以上,如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤其以槐花米()和荞麦中含量最高,可作为大量提取芦丁的原料,芦丁是由槲皮素(Querecetin)3位上的羟基与芸香糖(Rutinose)脱水而成的甙类化合物。芦丁为淡黄色粉末或针状结晶,含有三分子的结晶水,熔点为177-178?。芦丁略溶于热水(1:200),难溶于冷水(1:8000),溶于热甲醇(1?7)、冷甲醇(1?100)、热乙醇(1?30)、冷乙醇(1?650),难溶于醋酸乙酯、丙酮,不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚等,易溶于吡啶及稀碱液中。OHHOOOHOROHO芸香苷R=,葡萄糖,鼠李糖槲皮素R=H三、实验原理由槐花米中提取芦丁的方法很多,目前我国多采用碱提酸沉的方法,其原理是:根据芦丁分子中具有酚羟基,显弱酸性,能与碱成盐而增大溶解度,向此盐溶液加入酸,调节pH值,则芦丁又重新游离析出,从而获得粗制芦丁。除此方法外,还可以采用沸水提取或醇提取法。四、实验器材与试剂器材:铁架台,烧杯,电炉,烘箱、水浴锅、三角烧瓶,布氏漏斗,滤纸,试管,层析槽,石棉网,毛细管等。试剂:芸香苷标准品,生石灰,HCl,乙醇,甲醇,镁粉,醋酸镁,AlCl,氯仿,铁氰3化钾等。五、实验内容11、实验操作流程图槐花米粗粉20g加水300ml,用石灰乳调节pH至8-9;加热至微沸,维持pH至30min,趁热抽滤滤液残渣(弃去)放置,冷却60-70?,用浓HCl调至pH4-5,静置1小时,抽滤滤液(弃去)沉淀(精制芦丁)重结晶残渣(弃去)滤液静置,过滤,在60-70?干燥芦丁(精制品)2、具体操作步骤(1)芦丁的提取称取槐花米20g,置于干燥的研磨中用钵棒挤压成粗粉。称取1-(生石灰),置于干净的小研钵中加入10ml水后研成乳液备用。将粉碎的槐花米置于500ml的烧杯中,加水300ml,在搅拌下加入石灰乳,调节pH至8-9,加热微沸,维持pH值至30min,趁热抽滤。弃去滤渣,冷却至60-70?,用浓HCl调至pH4-5,静置1h,析出精制芦丁,抽滤,弃去滤液,收集精制芦丁。将精制芦丁悬浮于蒸馏水中,加热煮沸15min,然后趁热过滤,弃去不溶物,充分静置,过滤,收集芦丁结晶,在60-70?干燥,得到芦丁精制品。(2)芦丁检识取芦丁3-4mg,加乙醇5-6ml使其溶解,分成四份做以下实验:?盐酸-镁粉反应:取试样溶液各2ml,分别置于两支试管中,各加入镁粉少许,再加入盐酸数滴,观察并记录颜色变化。2?Molish反应:取试样溶液各2ml,分置于两支试管中,加10,α-萘酚乙醇溶液1ml,振摇后倾斜试管45?,沿管壁滴加1ml浓硫酸,静置,观察并记录两液面交界处颜色变化。?醋酸镁反应:取两张滤纸条,分别滴加试样溶液后,加1,醋酸镁甲醇溶液2滴,于紫外灯下观察荧光变化,并记录