乙肝疫苗制备.ppt

乙肝疫苗的制备彪憨尧坟迈舱享堵抄捣欢苟犹粪取冀哄沼遭狗引钦湍苯祈竭慨奠皮概研痔乙肝疫苗制备乙肝疫苗制备乙肝疫苗的概念乙肝疫苗是用于预防乙肝的特殊药物。疫苗接种后,可刺激免疫系统产生保护性抗体,这种抗体存在于人的体液之中,乙肝病毒一旦出现,抗体会立即作用,将其清除,阻止感染,并不会伤害肝脏,从而使人体具有了预防乙肝的免疫力,从而达到预防乙肝感染的目的。接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。情户役缕贼窘舌孟馏挫瘦袁钱最蔑烂杯蛀雏六均蜗巷遏陪助刊喧冶娩勺应乙肝疫苗制备乙肝疫苗制备乙肝疫苗的发展史乙肝疫苗形成于1986年,为了得到乙肝疫苗,研究人员从研究复试病毒,到酵母,并研究纯化的蛋白质序列。并经过了大量的诱导免疫反应。1991年,疫苗被应用于高危险人群。主要是一些儿童,因为儿童的感染率极高。2005年,美国推行常规的疫苗注射。给所有未注射过乙肝疫苗的儿童注射。治疗性疫苗是指在已感染病原微生物或已患有某些疾病的机体中,通过诱导特异性的免疫应答,达到治疗或防止疾病恶化的天然、人工合成或用基因重组技术表达的产品或制品伏匈截桂峡榆嫌考艾闯女玻靖苔特拯饰景依椰硷儿社肾啡弄全娄噪供颖荡乙肝疫苗制备乙肝疫苗制备乙肝疫苗的制备目前使用的乙肝疫苗是基因工程疫苗--重组酵母乙肝疫苗和重组CHO乙肝疫苗,其主要成分是乙肝病毒的表面抗原,即一种乙肝病毒外衣壳蛋白,并非完整病毒。这种表面抗原不含有病毒遗传物质,不具备感染性和致病性,但保留了免疫原性,即刺激机体产生保护性抗体的能力。乙肝表面抗原曾经是从乙肝病毒携带着的血液,经纯化灭活等严格工序制备而来,即血源性疫苗,该疫苗由于安全、来源和成本等原因已被淘汰(如,有引起血源性疾病的嫌疑和浪费大量的血基因工程乙肝疫苗是采用基因工程技术生产的,即构建含有乙肝表面抗原基因的重组质粒,然后转染相应的宿主细胞,如酵母、CHO细胞,生产乙肝表面抗原蛋白。利用重组酵母生产的叫重组酵母乙肝疫苗,利用CHO细胞生产的叫重组CHO乙肝疫苗,剂量为每支5微克。它们都可以用于预防所有已知亚型的乙肝病毒感,都可以放心选用。况捉反肋湖逾脂抠汝蛹差居敖骇宠巩帖配尉望最掩龟酬枯锚火抵攀俭樟窍乙肝疫苗制备乙肝疫苗制备基因工程乙肝疫苗是乙肝表面抗原(HbsAg)亚单位疫苗,它系采用现代生物技术将乙肝病毒表达表面抗原的基因进行质粒构建,克隆进入啤酒酵母菌或CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)中,通过培养这种重组酵母菌或CHO细胞来表达乙肝表面抗原亚单位。发酵后经过细胞破碎和一系列微滤、超滤、硅胶吸附、洗脱等工序,再经过疏水层析,可使产品抗原蛋白纯度达99%以上。:cDNA文库法,化学合成法,反转录法愚拾乐方越闷砧陡者充足霹狞童奈汝秒涧丽肮剖声入澈瑚午粱铜村墒眩仙乙肝疫苗制备乙肝疫苗制备工程菌的选择CHO细胞的特点①具有准确的转录后修饰功能,表达的糖基化药 物蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然蛋白分子②具有产物胞外分泌功能,便于下游产物分离纯化;③具有重组基因的高效 扩增和表达能力;④具有贴壁生长特性,且有较高的 耐受剪切力和渗透压能力,可以进行悬浮培养,表达水平较高;⑤CHO细胞属于成纤维细胞(fibrob2last),很少分泌自身的内源蛋白,利于外源蛋白的后分离蹄辕扩绚身对簇煎彝迂宛静贝蔗鹤劣纱辊淫寻充篡党耙厉坡党笋惧吹诞围乙肝疫苗制备乙肝疫苗制备主要试剂限制性内切酶、T4DNAligase、质粒DNA提取和柱式胶回收试剂盒乙型肝炎表面抗原检测试剂盒DMEM和透析胎牛血清胰蛋白酶、氨甲喋呤(MTX)MHBsAg血凝检测试剂盒沮怎饺银孺蘑玩柴啡涣皑朗呐女衍苞榨挂滑俘草推肃篡烁卞疑布柑葵渝楚乙肝疫苗制备乙肝疫苗制备主要试剂限制性内切酶、T4DNAligase、质粒DNA提取和柱式胶回收试剂盒乙型肝炎表面抗原检测试剂盒DMEM和透析胎牛血清胰蛋白酶、氨甲喋呤(MTX)MHBsAg血凝检测试剂盒淘测糜痞菇幻舰惋瑚伦燃逞柞硷投纯沛石热诞它谜碘粘淘他貉可抡逃稿饥乙肝疫苗制备乙肝疫苗制备