菌落总数的测定.doc

菌落总数的测定(-2010食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定)(Aerobicplatecount)的测定方法。适用于食品中菌落总数的测定。,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(ml)检样中形成的微生物菌落总数。,其他设备和材料如下::36??1?,30??1?。:2?,5?。:46??1?。;。。。:1ml()、10ml()或微量移液器及吸头。:容量250ml、500ml。:直径90mm。。。:。:。:。(ml)样品+225ml稀释液,均质菌落总数的检验程序见图5-4-2-1。:称取25g选择2个,3个适宜稀释度的样品均样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生液,各取1ml分别加入无菌培养皿内理盐水的无菌均质杯内,8000r/min,10000r/min均质1min,2min,或放入每皿中加入15ml,20ml平板技术盛有225ml稀释液的无菌均质袋中,琼脂,混匀用拍击式均质器拍打1min,2min,制成1:10的样品均液。:以无菌吸管吸取25ml样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理计数各平板菌落数盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成计算菌落总数1:10的样品均液。:10样品均液1ml,沿管壁缓慢注于盛有9ml稀释液的无菌试管中(注意习惯或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1::10的样品匀液。,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1ml无菌吸管或吸头。,选择2个,3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1ml样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取1ml空白稀释液加入两个平皿内作空白对照。,20ml冷却至46?的平板技术琼脂培养基(可放置于46??1?恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。,将平皿翻转,36??1?培养48h?2h。水产品30??1?培养72h?3h。,可在凝固后的琼脂表面覆盖一层琼脂培养基(约4ml),凝固后翻转平板,。,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony