熊果酸诱导Jurkat细胞凋亡及其作用机制的研究.pdf

中国医科大学研究生学位论文独创性声明嬲本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:噩塞塞日期:型壁垒臼生丑中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外),以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名:童粤盖_Z。一指导教师签名:<盘!丝卫:L日期:碰玺占且绷目录一、摘要中文摘要????????????????????????????‘l英文摘要????????????????????????????3二、英文缩略语???????????????????????????6三、论文前言????????????????????????????????????????7刖蟊????????????????????????????????????????,材料与方法???????????????????????????7实验结果???????????????????????????··13讨论???????????????????????????????????????·16结论???????????????????????????????????????·18四、本研究创新性的自我评价????????????????????”19五、参考文献???????????????????????????”20六、附录综述??????????????????????????????????????·22致谢???????????????????????????????????????·3个人简介????????????????????????????32·中文论著摘要·熊果酸诱导Jurkat细胞凋亡及其作用机制的研究目的观察熊果酸(UA)诱导人T细胞白血病/淋巴瘤(Jurkat)细胞株生长抑制和凋亡作用,并探讨其作用机制是否涉及PTEN的调控,为熊果酸在淋巴系统肿瘤中的应用提供理论依据。方法一、细胞培养Jurkat细胞复苏后常规培养于含10%胎牛血清(FBS)、100U/ml青霉素、100ug/n[1l链霉素的RPMll640培养液中,置于37"C、5%C02的饱和湿度培养箱中培养。2~3天换液传代一次,取对数生长期细胞为实验对象。二、0aH法检测熊果酸对Jurkat细胞的增殖情况实验分为二个组,不加药对照组、实验组(、、、),在37*(2、5%C02、饱和湿度条件下培养12、24、48小时。、不同时间作用细胞后的增殖情况。三、Hoeohst33258染色共聚焦显微镜观察细胞核形态分别收集不加药对照组、、、48d,时的细胞,经Hoechst33258染色后荧光显微镜下观察细胞核形态学改变,进行图像采集。四、.^nnexnv/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率分别收集不加药对照组、、、48dx时的细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。五、实时定量RT--I隙分析Jurkat细胞PT雕啊刚A的表达分别收集不加药对照组、-Lmol/L熊果酸组、、48小时的细胞,提取细胞总RNA,反转录得到对应的cDNA,,记录循环阈值(Ct值),计算PTEN基因的表达量。结果1、在一定药物浓度范围内,UA能显著抑$1]Jurkat细胞的生长。、、、(+)%、()%、(+)%、(-)%,处理24d'时增殖抑制率分别为()%、()%、(-a:)%、()%,处