金属离子亲和层析的应用目录一、亲和层析二、金属离子亲和层析三、金属离子亲和层析的应用四、金属离子亲和层析的局限一、亲和层析亲和层析是利用配基、配体之间专一可逆结合性质进行物质分离的方法,因此其专一性、选择性是极高的。亲和层析的过程1、寻找可与底物专一可逆结合的配基2、将配基通过共价键偶联到基质,并要求偶联后配基与配体的亲和力不变3、配基与配体吸附并与杂质分离,将杂质洗出4、洗脱目标物亲和层析的分类1、生物亲和层析2、免疫亲和层析3、金属离子亲和层析4、有机染料亲和层析5、拟生物亲和层析二、金属离子亲和层析(IMAC)金属离子亲和层析是建立在蛋白质表面暴露的一些氨基酸残基与固定化金属离子的亲和力的不同来进行蛋白质分离纯化的一项技术金属离子:锌、铜、铁等氨基酸残基:组氨酸的咪唑基、半胱氨酸的巯基、色氨酸的吲哚基金属离子亲和层析优点1、配基简单,吸附容量大2、价格便宜,投资低3、通用性强4、分离条件温和5、金属离子配基具有很好的稳定性,且层析柱可长期连续使用,易于再生。三、金属离子亲和层析的应用纯泰 Ni-NTA金属螯合His蛋白纯化介质填料(His镍柱)
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