第八章药物制剂的微生物学检查.pptx

第八章药物制剂的微生物学检查科学出版社卫生职业教育出版分社【学习目标】,了解药物的体内抗菌试验。,熟悉特殊药品的无菌检查方法。、霉菌和酵母菌计数方法,熟悉药品的大肠埃希菌检查方法。、沙门菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌的检查方法。科学出版社卫生职业教育出版分社第一节药物的抗菌试验药物的抗菌试验目的是为了检查药物的抗菌能力,包括药物的抑菌试验和杀菌试验。一般先进行体外抗菌试验,再进行体内抗菌试验。科学出版社卫生职业教育出版分社一、药物的体外抗菌试验(一)(minimalinhibitoryconcentration,MIC),MIC是指药物能抑制细菌生长的最低浓度,以μg/ml或U/ml表示,数值愈小,药物的抑菌作用愈强。科学出版社卫生职业教育出版分社(1)液体培养基稀释法:在试管中用液体培养基进行2倍系列稀释药物,使其终浓度(μg/ml)为512、256、128、64、……等→在每管中加定量的试验菌液(5×105cfu/ml)→24~48h培养→观察结果,以能抑制试验菌生长的最低浓度为该药的MIC。如何判断抑菌还是杀菌?科学出版社卫生职业教育出版分社液体培养基稀释法测定药物的最小抑菌浓度(MIC)科学出版社卫生职业教育出版分社液体培养基稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)通过平板培养证实科学出版社卫生职业教育出版分社(2)固体培养基稀释法:1)平板法:方法:将不同浓度的药液按1︰9混入尚未凝固的琼脂培养基中(厚度3~4mm)→制作成含有递减浓度药物的琼脂平板→将定量的菌液()→点种法逐个点种于平板(要进行阴性对照)→培养→测得各种细菌对药物的MIC(μg/ml)。应用:测定多种细菌对同一药物的MIC;各种药物的抗菌活性测定;新抗菌药物的筛选。优点:不受药物颜色及浑浊度的影响,且手续简便。科学出版社卫生职业教育出版分社2)斜面法:方法:将不同递减浓度的药液→混入未凝固的装有琼脂培养基的试管中→制成斜面→接种定量的试验菌液→培养→测知MIC(μg/ml)。应用:适用于必须较长时间培养的试验菌(如结核杆菌)或避免孢子飞扬污染环境的霉菌。:是利用药物在琼脂培养基中扩散,并在一定浓度范围内抑制细菌生长,形成无菌生长的透明圈即为抑菌环。抑菌环的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的MIC呈负相关关系(抑菌环越大,MIC越小)。方法:在琼脂平板上→接种(涂布法或倾注法)试验菌→加药于平板上→培养18~24h→观察测量抑菌环直径,或抑菌范围的大小→评价药物抗菌作用的强弱。应用:用于定性试验;初步判断药物的抗菌作用的大小。缺点:精确度较差、干扰因素较多。