抗人β2微球蛋白单克隆抗体的制备及鉴定.doc

抗人β2微球蛋白单克隆抗体的制备及鉴定.doc抗人132微球蛋白单克隆抗体的制备及鉴足[摘要]目的:制备抗人B2微球蛋白(32-microglobulin,02-MG)单克隆抗体并对其进行鉴定。方法:用高纯度的P2-MG免疫BALB/C小鼠,按常规技术制备针对B2-MG不同抗原表位的单克隆抗体,并对其进行纯化,测定抗体亚类、抗原表位分析等。结果:筛选出10株抗人P2-MG杂交瘤细胞株,EIJSA间接法证实这组单克隆抗体仅与B2微球蛋白反应,而与其他蛋白无交叉反应,IgG亚类鉴定6株为IgGl,2株为IgG2a,1株为IgA,1株为IgM。结论:获得特异性的抗人B2微球蛋白单克隆抗体,为试剂盒的开发研究奠定基础。[关键词]B2微球蛋白;单克隆抗体;制备;鉴定[中图分类号][文献标识码]B[文章编号11673-7210(2008)06(a)-036-02ProductionandidentificationofmonoclonalantibodiesagainstP2-microglobulinDUHui-fen,LIKe~sheng,LIANXiao-wen,YUANMing,YEWen~hua(MedicalBiotechnologyCenter,GansuMedicalResearchInstitute,Lanzhou730050,China)[Abstract]Objective:Toprepareandidentify【nonoclonalantibodies(McAb)againstP2-:Balb/binantP2-microglobulin,andthefiItrationandidentificationofthemAhagainsttheP2-microglobulinwasperformedusingindirectenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA).Results:TenstrainsofhybridomaswereobtainedthatproducedtheinAbspecifictotheP2-microglobulinwithoutdetectablecross-,6wereidentifiodastheiimnunoglobulinG1(IgGl)isotype,asTgG2a,:Thesespecificagainstthe2-microglobulinmayprovideabasisoffurtherresearchesonthepathogensis,proteinology,andearlydiagnosis.[Keywords]02-microglobulin;Monoclonalantibodies;Preparation;IdentificationB2微球蛋白(32-MG)[1]是由100个氨基酸组成的单链多肽,,存在于除红细胞和胎盘滋养层细胞以外的所冇冇核细胞屮,尤其在淋巴细胞和单核细胞存在丰富,在其免疫应答中起重要作用。已报道的测定32-MG的方法有多种,包括放射免疫分析法(RIA)、酶联免