两种不同细胞颗粒分泌机制的初步研究.pdf

华中科技大学
硕士学位论文
两种不同细胞颗粒分泌机制的初步研究
姓名:许亮
申请学位级别:硕士
专业:生物物理学
指导教师:徐涛
20040507
华中科技大学硕士学位论文摘要真核细胞一般通过囊泡瓿缮锓肿拥目缒ぴ耸洌蚁赴诓煌遗肩负不同物质的运输任务。我们成功的在细胞中用荧光蛋白标记了两类囊泡,并研究了它们在转运过程中的动力学特性及分子机制。虽然很多细胞是通过囊泡运输各种物质的,但在有些细胞中,如自然杀伤对其分泌机制的研究将有助于攻克某些人类疾病。目前我们已经成功的对自然杀伤细胞中分泌溶酶体的分泌调节机制进行了初步研究,同时对其生成途径有了一定的捎萌诜瓷溆ü庀晕⒓。以上证据说明分泌溶酶体的产生有蛋白激酶藕磐返牟斡攵移淅丛床皇歉叨濉关键词:分泌;类突触小囊泡;致密核心大囊泡;全内反射荧光显微镜;分泌溶酶体,蛋白激酶,赴词峭ü置谌苊柑耸涓髦稚锓肿拥摹自然杀伤细胞对癌细胞、病毒、胞内寄生菌和老化变异细胞都具有极强的清除能力,类突触小囊泡琒淖T撕头置诨撇钜臁我们用红色荧光蛋白经肽融合标记大囊泡,用绿色荧光蛋白珽与囊泡乙酰胆碱转运载体融合标记小囊泡。结果显示在外钙环境下,两种囊泡动力学特征没有显著差异,同时在膜下氖吭抖嘤贚。肍—染色发现自然杀伤细胞在/的饔缶突岢鱿分泌现象。使用光学切片技术发现吖啶橙,昙堑淖匀簧鄙讼胞在内皮细胞活化后或者在碳ず笃淠诓康姆置谌苊柑迨炕岽罅吭黾樱庵现象会被蛋自激酶,的抑制剂阻断,同时用破坏高尔基体不能阻碍分泌溶酶体的增加,从自然杀伤细胞的三维重组模了解。,和甤猯
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学位论文作者签名:名年钇学位论文作者签名:饵彩训牛年曰期:缈釬月独创性声明学位论文版权使用授权书保密口,在——年解密后适用本授权书。日期:年,月的研究成果。尽我所知,除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和不保密自。本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。日期:借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。朐谝陨戏娇蚰诖颉”指导教师签名:本论文属于
本研究课题得到国家餑、和国家自然科学基金.:,,资助,同时还得到鹱助。
——————————————————————————————————————————————————,因为有着致密的电子中心,故被称为致密核心大囊洲啊俊K淙涣街帜遗有一些共同性质,如它们都对钙敏感,它们的分泌都受蛅榈肌】.置谀遗分泌作用是指真核细胞中含有待分泌物的包被小泡与质膜融合,从而将内含物排出胞外的过程。在组成型分泌活动中,分泌作用是自发进行的,但是在调节型的细胞中,分泌作用必需有信号的触发。根据目前研究结果,分泌过程可大体分成以下几个主要步骤:转运、定向、捆绑、锚定、融合、分泌,每一步骤在不同组织与细胞中可略有不同,在同一细胞的不同步骤也可能有不同的异构体参与,在所有步骤中以膜融合过程最为关键,研究也最多。在神经元细胞中有两种类型囊泡,突触小囊泡和致密核心大囊泡。氨基酸类神经递质例如谷氨酸、甘氨酸和“彼峒暗湫偷纳窬葜室阴5ḿ詈投璺影范贾存在突触小囊泡,小】,而肽类神经递质则贮存在是它们的来源、位置和调控机制都是不同的。诜词礁叨澹缘骺分泌途径分泌,的膜以组成途径分泌和回收【。从活性区分泌,而从胞体和突触都可释放‘”。大小囊泡需接受不同的刺激然后释放,以完成不同的神经为了更好的了解神经和内分泌的功能,我们必须了解大小囊泡的分泌机制。虽然对囊泡转运和分泌的分子机制做了大量研究工作,但是和T撕头泌调控机制的差别却很少有人研究。比较两种分泌机制的特性是为了揭示不同的物质是如何通过不同途径转运和不同的钙机制进行调控的。等曾经记录到持续的快释放过程和穆头殴【恰5钦庖患偎等春虷蚗昙锹嫉降牡グ防嘣谑雀跸赴械目焓放过程相矛盾‘’。这就提出了一个问题:是否同~种类型囊泡的不同状态或者不同种囊泡的分泌具有多种动力学分泌机制。现在膜电容法不能区分两种类型囊泡的功能【⑼狻
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