人BMP-2基因治疗修复骨缺损的实验研究.pdf

上海第二医科大学
博士学位论文
人BMP-2基因治疗修复骨缺损的实验研究
姓名:徐小良
申请学位级别:博士
专业:外科学(骨科)
指导教师:戴尅戎

人蛑瘟菩薷闯す歉晒侨彼鸬氖笛檠芯中文摘要及免疫组化检测的表达、猤Ⅲ..,,分期行摺⒓屏孔橹Ъ觳和生物力学测定。匝蚬侨彼鹦蠥基因治疗前后机体对腺病毒的细骨髓间充质干细胞晒腔钚缘挠跋臁Q兄埔恢志哂刑烊还墙峁沟材料与方法:逋庥盏挤只觳猓撼槿⊥眉把蚬撬韪韶培养,分为镜观察。闶蠹∧谟盏汲晒鞘匝椋蠿线和组织学检查。票杆囔焉展牵载体组;颍醋H綛加载体组;Ⅳ.珊瑚加胶原载体组;粗瘟谱椤7直煅烧骨;.狟蜃H镜腂加;⒀螂止歉晒侨彼研究目的:评价腺病毒介导的人骨形态发生蛋白蜃H径甌/双相可吸收煅烧骨⒍云湓贐基因给药中作为载体的效果进行评价。评价甴基因转染的氩煌脑靥珊瑚、蛳赴饣复合的组织工程化人工骨对大动物长骨干骨缺损的修复效果。评价机体对甴基因治疗的免疫学反应。研究话肴樘擒彰甮在成骨细胞中的表达状况,为阐明酆现⒌姆⒉』硖峁┮谰荨组:转染细胞组腺病毒介导的转染细胞组;旧ā定量测定、.觳夤歉扑氐谋泶锖屯干涞行胶原表面涂层、哐苌浞治觥⑸璧缇观察和生物力学测定,并和基因转染的春现踩肼闶笃は滦杏盏汲晒鞘匝楹脱蛱迥谖帐奔的检测。薷赐描愎歉晒侨彼,侧骨缺损分为椋孔侧:瓵..H綛与珊瑚及胶原载体组;..,单侧植入体外掏建的组织工程化骨,、计量组织学检查和生物力学测定。病毒介导的瓸H綛组侧虎螅醋H綛组侧籲,.醋H鞠赴椤7直鹦蠭痺和癡上海第二医科大学博士学位论文
染细胞组仅见少量宓谋泶铮籄H鞠赴楹虯·转染细胞结论:.蜃H镜腂有较强的诱导成骨能力,双相煅烧骨在基因给药中是良好的细胞载体。.蛐奘蔚淖橹こ袒斯す可以修复大动物负重骨的节段性缺损,有望成为修复骨缺损的治疗方法。腺病毒介导的基因治疗可引起机体对腺病毒的细胞及体液免疫反应,从而逐渐消除腺病良好的孔隙率、一定的生物力学强度和合适的生物降解性:双相煅烧骨加Ⅲ、Ⅳ和榈挠下剩直鹞/////<屏孔橹荆肫渌示淋巴细胞的增殖于植入后銮浚后下降。血浆腺病毒中和抗体滴度胞和体液免疫反应进行检测。ê蚏觳庋蚝腿薆中谋泶铮⒎:逋馐匝椋篈组泶锊⒎置趆,该组活性增强,并有钙结节形成,而其它两组未见。.锽表达骨钙素的水平较其他两组高,透射电镜观察见转染后细胞内粗面内质阿、线粒体和溶酶体增多。闶蠹∧谧⑸浜螅珹..橛忻飨砸煳怀晒牵渌阶榧维组织形成或微量成骨。::埽珹..H咀橛忻飨怨丘栊纬蓒周,ⅱ颉ⅱ騃、Ⅳ、榈挠合率,分别为、、、。螂止歉晒侨彼:撸~组相比,榈男律橇孔疃啵簧锪ρР馐允綢组的力学强度最大。螂止干骨缺损篨线检查示,周,.H咀榈难螂止歉晒侨损内有明显骨痂形成;周,Ⅱ和Ⅳ组的愈合率分别为、、及痩。组织学检查显示,与其它组相比,,淋巴细胞与基因转染的旌吓嘌即明显升高,持续以上。闶蟪す橇蕉恕⑺芍使羌耙煳还堑某晒窍赴破骨细胞可见多量猘谋泶铩L逋釨的旧ê蚏荆何醋组可见大量郺谋泶铩转染诱导对谋泶锏挠跋臁周,甴转染组的羊胫骨干骨缺损内有明显骨痂形成;周,上海第二医科大学博士学位论文
毒的基因和帽关蛋白的影响。成骨细胞和破骨细胞可表达多量昧街窒赴的狈赡苁荕酆现⒐趋酪斐5闹苯釉颉间充质于细胞煅烧骨【关键词骨形态发生蛋白类骨缺损免疫反应半乳糖苷酶基因疗法腺病毒组织工程成骨细胞上海第二医科犬学博士学位论文
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人蛑瘟菩薷闯す歉晒侨彼鸬氖笛檠芯】等尝试通过体内转染法,注射带有人虻闹刈橄俨《引言有一定的效果,但它有一些缺点如体内半衰期短,需要量大、,‘0,修复小鼠、大鼠或兔的桡骨、股骨、牙周或颅骨的缺损口删,大鼠、兔