间接凝集抑制试验(妊娠试验).doc

实验7间接凝集抑制试验(妊娠试验)【目的】通过妊娠试验的基本操作过程,了解间接凝集抑制试验的原理、方法及应用。【原理】将待检抗原(或抗体)与已知可溶性的抗体(或抗原)先行混合,作用一定时间后,再与已知可溶性抗体(或抗原)对应的抗原(或抗体)致敏的乳胶颗粒作用,如待测样品中含有相应抗原(或抗体),便可与加入的抗体(或抗原)结合。当再加入抗原(或抗体)致敏颗粒后,则无相应的抗体(或抗原)与胶乳颗粒表面的抗原(或抗体)结合,因而不出现凝集现象,此为胶乳凝集抑制试验。因此不发生凝集者表明待测样品中含有相应抗原(或抗体),为阳性;发生凝集者说明样品中无相应抗原(或抗体),为阴性。孕妇尿液中含有绒毛膜促性腺激素(HCG),正常人尿中无。当向孕妇尿中加入一定量HCG抗体时,由于发生抗原抗体反应,抗体被消耗。此时,再往尿中加入胶乳抗原(吸附有HCG的聚苯乙烯胶乳颗粒),因已无抗体,故不能发生凝集——即凝集被抑制,为凝集抑制试验阳性;反之,被检尿中无HCG(非妊娠尿),加入HCG抗体后未被结合和消耗,胶乳抗原加入后,抗原与抗体发生反应,出现肉眼可见的均匀细小颗粒——即凝集末被抑制,为凝集抑制试验阴性,亦即妊娠试验阴性。【材料】(吸附有HCG)、兔抗人HCG免疫血清(含抗HCG抗体)、生理盐水。、正常人尿液、待检尿液。、毛细滴管、牙签、特种铅笔。【方法】~3cm大小漆圈的黑色玻璃板,用特种铅笔做好标记,圈1作为试验,圈2作为阳性对照,圈3作为阴性对照。、孕妇尿液、正常人尿(或生理盐水)各一滴于圈1、圈2和圈3内,然后于上述三圈内各滴加免疫血清一滴,分别用牙签(或火柴棒)混匀。在桌面上连续缓缓摇动1~2min。,混匀,再连续摇动2~5min,观察