乳糖微生物限度检查方法验证.doc

乳糖微生物限度检查方法验证方案乳糖微生物限度检查方法验证方案######## 有限公司乳糖微生物限度检查方法验证方案验证目录 1引言 2药品名称 3试验用菌种要求与类别 4培养基 5试液 6验证方法依据 7操作方法 8结论乳糖微生物限度检查方法验证方案批准编号: ############ 内容项目职位/姓名签名日期起草人审核人审核人审核人批准人乳糖微生物限度检查方法验证方案 1引言: 概述: 按照国家食品药品监督管理局规定, 要求产品的微生物限度检查方法必须依照产品进行方法学验证。在辽宁省药品检验所抗生素室专家的指导下制定了乳糖微生物限度检查方法验证方案。开始日期: 年月日结束日期: 年月日验证部门:化验室 QC主任起草并组织实施化验员实验操作化验员实验操作质量部资料整理 2药品名称:乳糖产品批号: 生产企业: 沈阳利得尔化工制剂技术有限公司曲阜市天力药用辅料有限公司 3试验用的菌种要求与类别: 要求:验证试验所用的菌株传代次数不得超过五代。类别: ①大肠埃希菌[ ( B) 44102] ②金黄色葡萄球菌[ ( B) 26003] ③枯草芽孢杆菌[ ( B) 63501] ④白色念珠菌[ ( B) 98001] ⑤黑曲霉[ ( B) 98003] 4培养基: ①胆盐乳糖培养基②改良马丁培养基③改良马丁琼脂培养基④营养肉汤培养基⑤营养琼脂培养基乳糖微生物限度检查方法验证方案⑥玫瑰红钠琼脂培养基⑦伊红美兰琼脂培养基 5试液: 氯化钠-蛋白胨缓冲液配制方法:取磷酸二氢钠 、磷酸氢二钠 、氯化钠 g、蛋白胨 1g、加纯化水 1000 微热熔解,分装, 121 ℃高压灭菌 20分钟。 6验证方法依据: 《中国药典》 2010 年版二部,有关微生物限度检查方法验证试验 7操作方法: ( 1)取经 37℃培养 18-24 ℃,金黄色葡萄菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的肉汤培养物 1ml+9ml ﹪无菌氯化钠溶液, 10倍稀释至 10 -5 -10 -7, 细菌数约为 50-100cfu/ml , 做活性菌计数备用。( 2)取经 25℃培养 18-24 小时的白色念珠菌改良马丁培养物 1ml+9ml ﹪无菌氯化钠溶液, 10倍稀释至 10 -5 -10 -7,细菌数约为 50-100cfu/ml ,做活性菌计数备用。( 3)取经 25℃培养 1周的黑曲霉斜面培养物,加 3- ﹪无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱,然后,吸储孢子悬液(用管口带有薄的无菌棉花或纱布能过滤菌丝的无菌毛细管)至无菌管内,吸取 1ml+9ml ﹪无菌氯化钠溶液, 10倍稀释至 10 -5 -10 -7, 细菌数约为 50-100cfu/ml ,做活性菌计数备用。 10g ,加 ﹪蛋白胨氯化钠稀释液( PH70 ) 90ml 浓度均为 1: 10供试液,分别人工污染上述 5种代表试验菌株。 ( 1 )试验组取 1: 10 供试液 1ml 和 50-100 个/ml 试验菌株同时加入平皿中,立即倾注琼脂培养基,每株试验菌平行制备 2个平皿,待凝固后,置规定温度培养 24-7 2 小时观察结果。(