转基因作物pat蛋白的双抗体夹心酶联免疫检测方法研究.pdf

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转基因作物鞍椎乃ǹ固寮行拿噶C庖呒觳夥椒ㄑ芯王敏张亮张威谭桂玉南铁贵圯曹振王保民砣引言笛椴糠由菌株畍中分离得到,其/一Ⅱ片段编码鞍祝ü挂阴8窤与草丁膦游离的氨基结合,形成复合物,从而使草丁膦失去活性⋯。』虮嗦氡泶锊飌鞍追肿恿吭嘉M炊厶澹个氨基酸组量极低旧虼烁没蚱我脖蛔魑R话阕;蜃魑锏谋昙腔颉转基因作物及其产品的检测方法主要有基于核酸水平的检测方法和基于蛋白质水平的免疫学检测:怂峒觳夥椒ㄍü觳獠迦氲耐庠椿颍跃酆厦噶词椒从为主覬,包括巢式⒕赫远縋⑹凳倍縋¨、和基因芯片‘У榷嘀旨觳饧际跏侄巍5鞍质水平检测方法主要有酶联免疫吸附法和免疫检测试纸条法—取C庖呒测试纸条操作简便、快速,但觳夥椒ú僮骷虻ァ⒘槊舳雀撸屎细咄考觳猓捎糜谧;蛲庠蛋白的定量检测。许文涛等¨引利用所纯化的蛋白制备得到了抗兔多克隆抗体,建立了鞍的检测方法并对转基因和非转基因油菜进行了鉴别,该方法的检出限为阻∥1狙芯坷盟票的抗鞍资蟮タ寺】固搴屯枚嗫寺】固澹⒘藀蛋白的双抗体夹心酶联免疫检测方法,方法灵敏度高,可用于转基因作物中鞍椎亩ㄐ院投考觳狻┰鲆美国猂公司磺碇悄旱缬疽北京六一仪器公司灰〈布暗缛群阄屡嘌箱虾V浅欠治鲆瞧髦圃煊邢薰;克隆载体⑩;克隆质粒狢;蛑柿本实验室保存淮蟪Ω司瓹菌株公司吮泶锞闎酆厦;硅胶模型。产物纯化试剂盒偈⒐竞成旧粲谝阴WR泼讣易澹胍阴WR泼咐嗑哂邢喽韵嗤慕峁购凸δ堋轏。鞍孜拗苯佣拘裕已知的毒蛋白无同源性,也不具过敏原的特性,如热或消化稳定性、无糖基化位点等,且在植物中的表达方法⒍嘀豍仪器与试剂自动洗板机依糡;胄幕德国;孔酶标板拦鶦。一公司公司籘第卷年月分析化学研究报告第期北京工商大学理学院生物技术系,北京市植物资源重点实验室,北京中国农业大学农学与生物技术学院,北京摘要将克隆到的基因构建原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达,分离纯化得到高纯度蛋白。用所得到的蛋白制备了兔多克隆抗体和鼠单抗6嗫剐Ъ,单抗效价为单抗为类,轻链为汀;诳筽耐蛋白单克隆抗体和兔多克隆抗体建立了双抗夹心酶联免疫分析方法。检测范围为—/咝曰毓榉匠蘺..龆ㄏ凳.。用所建立的方法测定了鲎;蚩钩婷藓个非转基因棉花品种叶片中鞍椎暮浚渲凶;蚩钩婷中的銎分旨觳獬鰌蛋白,其余均未检出鞍住关键词转基因作物;颍籶蛋白;双抗夹心酶联免疫检测法崭澹邮本文系转基因生物新品种培育重大专项资助~疭甁...—:甤畐.
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