生物样品前处理方法.ppt

生物样品前处理方法玫瘴雌悯徽盲稽予氖叫辐悦研括锅椒搞裳知执辰俗姨斧能邦唯抵蛔少着事生物样品前处理方法Powerbar模板組作品content生物样品处理目的前处理过程及方法分析方法的限度要求生物样品的种类腹兄矫锨铆吏估媚技期砸庐僻蛊旅羔衫举绍袭奄杰矢晋彻会薛玲线昂蹬肢生物样品前处理方法Powerbar模板組作品置含有抗凝剂的试管中,2500~3000rpm离心5~10min,淡黄色上清液,约为全血的50-60%药物动力学,生物利用度,临床治疗药物浓度监测置试管中,于37℃或室温放置30min~1h,血液凝固后,剥去试管壁上的血饼,2500~3000rpm离心5~10min,淡黄色液体,约为全血20-40%血清的获取量小,但血清成分更接近于组织液的化学成分,测定血清中有关物质的含量,比全血更能反映机体的具体情况加入抗凝剂混合,防止凝血后影响测定对于与红细胞结合的药物,(规定时间内采集尿液体积和排入尿中的药物总量)药物浓度高,但变化体内药物清除以原形、I相及II相代谢物等多种形式通过尿液排出排出预测药物代谢过程、类型,计算药物尿清除率、生物利用度的研究。在漱口后15min,安静状态下采集口腔内自然流出的唾液;也可在刺激下快速采样,石蜡片,聚四氟乙烯块,纱布球,柠檬酸,维生素C等置于舌尖,弃取初始部分后采集血浆游离药物浓度(P)密切相关,可使用唾液样品CS/CP比值较恒定时,可代替血样进行TDM及药代动力学研究头发组织:脑、心、肝、脾、肺、肾、胃等辆竖葱交滑适旧昏夫哮脂倔妨晨菱撮票作略厌竞曲促吧靖创撰本针伍馈沿生物样品前处理方法Powerbar模板組作品目的去除生物样品中的大分子杂质,满足测定方法对分析样品的要求保护仪器性能,改善分析条件分离并富集所要测定的成分药物从缀合物及结合物中释放--溶剂解法原理:使蛋白质的分子内及分子间的氢键发生变化而使蛋白质凝聚。常用有机溶剂:乙腈、甲醇、丙酮、四氢呋喃试剂用量:溶剂体积与血样比为1~3︰1操作:有机溶剂与血浆或血清按一定比例混合后离心分离,取上清液作为样品。注意采用超速离心(12000rpm)分离1~:中性盐使蛋白质脱水而沉淀常用中性盐:饱和硫酸铵、硫酸钠、镁盐、磷酸盐及枸橼酸盐等试剂用量:饱和硫酸铵与血清比例为2︰1操作:血清与中性盐按一定比例混合后超速离心(10000rpm)分离1~2min,取上清液作为样品。~。:强酸与蛋白质形成不溶性盐而沉淀。常用:10%三氯醋酸、6%高氯酸、5%偏磷酸等。操作:血清与强酸的比例为1:,离心(10000rpm)1~2min,即可。上清液pH0~4,不适于酸性下分解的药物。过量酸的排除:过量三氯醋酸可通过煮沸或乙醚提取除去;高氯酸、偏磷酸等可用碳酸钾、醋酸钾或氢氧化钠等中和后加乙醇使产生高氯酸钾(钠)沉淀被除去。:使组织溶解,使药物析出。一种细菌性碱性蛋白分解酶,可在较宽的pH活圈(~)内使蛋白质的肽键降解,在50~60℃具有最大活力。优点:可避兔某些药物在酸及高温下降解,对与蛋白质结合牢的药物(如保泰松、苯妥英纳),可显著改善回收率;可用有机溶剂直接提取酶解液而无乳化现象。不适用于在碱性下易水解的药物。琵果瞻耗驮伙署础感组略黍惹擎凰龋洪仿历杂饰范傻莱艰鹏亢哈济狙茄臣生物样品前处理方法Powerbar模板組作品