Caveolin-1降低EGFR突变阳性非小细胞肺癌对TKIs的敏感性.pdf

目录中文摘要?????????????????????????1 英文摘要?????????????????????????5 英文缩写?????????????????????????10 研究论文Caveolin-1降低EGFR突变阳性非小细胞肺癌对TKI$的敏感性前言?????????????????????????111。刖舌?????????????????????????材料与方法??????????????????????12 结果?????????????????????????2l 附图?????????????????????????24 附表?????????????????????????30 讨论?????????????????????????33 结论?????????????????????????36 参考文献???????????????????????37 综述非小细胞肺癌分子靶向治疗进展????????????.41 致谢???????????????????????????53 个人简历?????????????????????????54 万方数据中文摘要 Caveolin。1降低EGFR突变阳性非小细胞肺癌对TK s的敏感性摘要目的: 肺癌是癌症相关死亡的首要原因。其中非小细胞肺癌( cell lungcancer,NSCLC)占80%左右,大多数NSCLC诊断时已经属于晚期, 5年生存率不足15%。以铂类为基础的两药联合方案是晚期NSCLC的标准一线化疗方案,但是化疗有效率低、副作用大,近年来分子靶向治疗为晚期NSCLC提供了新的选择。表皮生长因子受体(epidermal growth factorreceptor,EGFR)属于具有酪氨酸激酶活性的HER家族中的一员。HER家族包括四大成员:HERl orEGFR,HER2,HER3及HER4。EGFR与配体特异性结合,形成同源或异源二聚体,导致EGFR胞内区自动磷酸化及酪氨酸激酶激活,-MAPK、,促进肿瘤细胞增殖、分化、迁移、侵袭等。目前发现,EGFR酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TⅪs)如吉非替尼、厄洛替尼等对带有EGFR基因敏感突变包括19外显子缺失突变、21外显子(L858R)替代突变的晚期NSCLC 病人治疗有效,因此,EGFR-TKIs广泛用于晚期NSCLC的治疗,但大部分初始治疗有效的病人最终会出现耐药,提示可能存在其它分子影响 EGFR信号通路,在NSCLC中发挥着重要作用。小凹蛋白一1(caveolin-1,)是细胞膜上Caveolae的重要组成蛋白,,包括178个氨基酸残基,C端残基与N端残基游离,并且伸入胞质内,位于肽链中间的疏水性氨基酸残基() 形成发卡样结构,。N端氨基酸残基为Cav一1的功能区,该区域与EGFR结合,从而参与肿瘤细胞增殖、粘附、迁移和信号转导。因此,-TKIs的敏感性。,通过:(1) 采用Westem 。(2)采用MTS 比色分析法、划痕修复试验、Transwell法检测厄洛替尼对稳定转染细胞万方数据中文摘要株增殖、迁移及侵袭能力的影响;(3)采用Westem blot法,检测厄洛替尼对EGFR及下游信号通路中各激酶活化水平的影响。 的表达是否可影响NSCLC对EGFR-TKIs的敏感性。方法: 。 。9/,次日换用含不同浓度厄洛替尼(0、、、、、、、) 的完全1640培养液继续培养48h,加入MTS溶液,通过测定各孔的吸光度(OD)值,计算细胞生长抑制率和厄洛替尼的半数抑制浓度(IC50)。 .9/,24h后用 10btl移液器吸头划痕,PBS洗去漂浮的细胞,两种细胞都分别于完全1640 -tmol/L厄洛替尼的完全1640培养液中继续培养, 在倒置显微镜下观察并拍照