测定方法-游离脂肪酸.doc

-乙醚混合溶液:无水乙醚与95%乙醚1:1(V)混合,:,摇匀,按下法标定其摩尔浓度。称取在125℃,,置于250mL锥形瓶中,以50mL蒸馏水溶解,加入2-3滴酚酞指示剂,用上述KOH溶液滴定至粉红色,同时做空白试验,KOH标准溶液摩尔浓度式中:G—邻苯二甲酸氢钾质量,gV—KOH溶液用量,mLV0—空白试验KOH溶液的用量,—每mol邻苯二甲酸氢钾的质量,g计算结果:=1%酚酞指示剂:1g酚酞溶于100mL95%,(FFA)含量的测定[1]:,置于锥形瓶中,用水浴微热熔融,加入预先中和的乙醚、乙醇混合液50mL,使之溶解,加入1%酚酞5滴,然后用氢氧化钾标准溶液滴至呈粉红色,10s内不退色为终点,记录消耗氢氧化钾标准液的毫升数。游离脂肪酸质量分数(以油酸计)为式中FFA-游离脂肪酸的质量分数V-消耗氢氧化钾标准溶液的体积(mL)C-氢氧化钾标准溶液的浓度(mol/L)282-油酸的摩尔质量(g/mol)m-样品质量(g)%中性甲醛:40mL甲醛溶于60mL蒸馏水中,用1mol/%百里酚酞:,:称取110gNaOH,溶于100mL无CO2的水中,摇匀,注入聚乙烯容器中,密闭放置至溶液清亮。,用无CO2的水稀释至1000mL摇匀。-110℃烘至恒重的邻苯二甲酸氢钾,加入无CO2水溶解,加2滴酚酞指示液,用配好的NaOH底至溶液呈粉红色,并保持30s,同时做空白实验。NaOH标准溶液的摩尔浓度式中:m—邻苯二甲酸氢钾质量,gV1—NaOH体积,mLV2—空白试验消耗NaOH的体积,mLM—邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量,:==(FAA)含量的测定:甲醛滴定法[8],置于2只三角瓶中,各加50mL蒸馏水,50℃。其中1份加入中性红指示剂3滴,用标准氢氧化钠溶液()滴定至琥珀色为终点,。另一份加入百里酚酞指示剂3滴和中性甲醛20ml,静置1分钟后,,。游离氨基酸含量计算公式:式中FAA%--氮的毫克当量N-标准氢氧化钠的摩尔浓度/mol/LV1-中性红做指示剂时消耗氢氧化钠的体积/mLV2-百里酚酞做指示剂时消耗氢氧化钠的体积/:(含浓缩胶缓冲液56%,甘油42%,SDS2%)与β-巯基乙醇2-ME20µL,溴酚蓝20µL混合,加蒸馏水定容至1mL,混合均匀,将混合溶液倒入2mL的带盖的试样管中。将试样管放入沸