观察根尖分生组织细胞有丝分裂.doc

“观察根尖分生组织细胞有丝分裂”实验方法的改进李新“观察植物根尖分生组织细胞的有丝分裂”是一个经典的高中生物学实验,却也是人教版高中生物必修1必做的十儿个实验中成功率最低的一个实验。说它经典是因为通过实验,学生可以真实观察并识别到细胞有丝分裂的各个时期,从而加深对课本上有关细胞有丝分裂过程比较抽象的理论知识的理解;说它成功率低,是因为如果按照教材的实验方法步骤去做①解离、漂洗需要时间较长,一节40分钟的课时间太紧迫。②%龙胆紫染液染色,细胞染色太深,往往发现显微镜下的视野呈紫色一片,根本看不清细胞结构,不易辨认染色体。③用两片载玻片压片,取下上面的载玻片时连带盖玻片甚至根尖也被取下了④解离时间不够充分,细胞不仅不容易分散开来,而且细胞重叠在一起,影响了观察。为了让学生可以真实地体验到成功的实验效果,笔者经过课前做了大量的预实验,同时参考其他老师的实验经验,通过不断改进实验方法步骤,摸索出了一套在40分钟课堂就可以明显观察到实验现象(指看到分裂相的细胞)的有效的实验方法步骤,有的班级一次成功率高达95%以上。现将改进的方法步骤介绍如下。一、实验材料的改进实验材料的选择按本校教学进度安排,本节实验课一般排在11月底12月初进行。按照教科书提供的实验材料洋葱进行生根培养,发现不易发根,即使发根了,生根数也少。原来我们地区市面出售的洋葱是本地产的洋葱。本地产的洋葱在深秋时收获,随即进人休眠期,休眠期一般为三个月左右,在此期间不发根或极少发根。而同时期用大蒜却容易发根,而且大蒜瓣多,每一瓣都可发根十儿条,比洋葱经济实惠的多。考虑到洋葱是鳞茎可培养生根,而在南方11月份上市的水仙、风信子等也具备鳞茎,是不是也可以作为观察根尖有丝分裂的材料呢?实践证明了水仙、风信子不仅容易生根,而且发根整齐、数量也多,也是观察的好材料。四种材料都是观察根尖有丝分裂的好材料,可根据需要选择。但还是推荐大蒜的根尖做实验材料,不仅生根容易、生根数多、经济实惠,更重要的是根比较细,相对容易解离,且分裂相的细胞也比较多。实验材料的预处理因为洋葱、大蒜、水仙、风信子等材料都存在休眠现象,在发根前先将材料放在4度的冰箱中3-5天。可以解除休眠,容易生根。(1) 根尖的培养与处理选用lOOmL的烧杯,将洋葱、水仙、风信子等外层干死的鳞片叶撕去,将洋葱、水仙、风信子的底盘旧根刮去,让洋葱、水仙、风信子的底部与烧杯口的水接触,放在阴暗处;将大蒜瓣剥去外边膜质枯衣,用牙签将蒜瓣串起,让牙签两端架在烧杯边缘,让蒜瓣的底部与烧杯曰的水接触。各个装置每天换一次水,在室温下放置4-5天,观察根长到2cm左右时,将整个培养装置(根连同烧杯)一起放入4度冰箱24小时进行低温处理,以便增加分裂相细胞。(2) 根尖的固定在上午10点至下午4点之间任何时段,剪取根尖2-3顷(长些比较好,以方便后面的解离、漂洗步骤)放入卡诺氏液(无水乙醇:冰醋酸=3:1)中浸泡24小时,而大蒜瓣可以直接将整个蒜瓣浸泡在卡诺氏液中(因为大蒜的根比较细,待需要时再剪取根尖更方便)o再放入85%乙醇半小时后,转入70%乙醇中4°C保存。笔者经过比较后发现,固定后的根尖不仅可以随用随取,而且可以缩短解离时间。二、“剪取根尖2-3mm,立即放入盛有盐酸和酒精的混合液(1:1)的培养皿中,在室温下