第十五章高效液相色谱法(Highperformanceliquidchromatography,HPLC)以液体为流动相的色谱分析方法称为液相色谱法(LiquidChromatography,LC)。液相色谱主要包括柱色谱和平板色谱(纸色谱和薄层色谱)等。1高效液相色谱法是以气相色谱为基础,在经典液相色谱实验和技术基础上,采用颗粒十分细的固定相,并采用高压泵输送流动相而建立的一种液相色谱法。2HPLC与经典LC区别经典液相色谱高效液相色谱常压或减压填料颗粒大柱效低分析速度慢色谱柱只用一次不能在线检测高压,40~50Mpa填料颗粒小,2~50μm柱效高,40000~60000块/m分析速度快色谱柱可重复多次使用能在线检测3HPLC与GC差别气相色谱高效液相色谱只能分析挥发性物质,只能分析20%的化合物不能用于热不稳定物质的分析用毛细管色谱可得到很高的柱效有很灵敏的检测器如ECD和较灵敏的通用检测器(FID和TCD)流动相为气体、无毒、易于处理运行和操作容易仪器制造难度较小几乎可以分析各种物质可以用于热不稳定物质的分析色谱柱不能很长,柱效不会很高没有较高灵敏的通用检测器 流动相有毒、费用较高运行和操作比GC难一些仪器制造难度大4流动相差别GC:流动相为惰性气体组分与流动相无亲合作用力,只与固定相作用HPLC:流动相为液体流动相与组分间有亲合作用力,为提高柱的选择性、改善分离度增加了因素流动相种类较多,选择余地广流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相可以增大分离选择性5操作条件差别GC:加温操作HPLC:室温;高压(液体粘度大,峰展宽小)67第一节液相色谱柱效8速率理论(与GC对比)
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