pcr技术上岗培训幻灯片.ppt

PCR技术上岗培训1疾病的诊断分子诊断影象学诊断细胞/组织诊断临床诊断免疫诊断生化诊断2几乎所有的疾病都是基因病科学研究已证明,基因可以揭示疾病的本质,人类几乎所有疾病都直接或间接与基因有关,在某种意义上都是基因病,3456PCR技术1985年美国人莫里斯(KaryMullis)发明了一种模拟DNA体内复制过程,在体外复制特定DNA片段的方法,并将其命名为聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR)。PCR可以在短时间内倍增极微量DNA(理论上说,仅有一个足够了)至百万或十亿倍,通过PCR可以简便、快速地从微量生物材料中获得大量特定的核酸,并具有很高的灵敏度和特异性,可用于微量核酸样品的检测。7PCR技术PCR技术被科学界誉为生物技术领域最伟大的发明之一,美国人莫里斯在发明该技术不久就因此于1993年获得诺贝尔化学奖。PCR及其相关技术于80年代末在国外开始应用:欧共体(现欧盟)、日本、美国相继把PCR这一基因诊断核心技术列入献血员筛查,美国食物与药品管理局已批准了60多种基因诊断试剂用于临床,美国国家疾病控制中心已把PCR技术列入疾病诊断的常规技术。(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA(25℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活性)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链。每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量既增加一倍。标准的PCR过程分为三步10