新城疫油苗和冻干苗疫苗生产工艺流程.doc

-4-(如10或10),尿囊腔内接种10日龄SPF鸡胚,。选接种后72~120小时死亡、且病痕明显的鸡胚,分别收获鸡胚液(尿囊液及羊水),装于灭菌容器内。将检验无菌、且对1%鸡红细胞凝集价?1:640(微量法1:512)的鸡胚液混合,定量分装于安瓿中,冷冻保存。注明收获日期,毒种代数等。-7-8-9按含毒鸡胚液量用灭菌生理盐水作为10倍系列稀释,取10、10、,,置36~37?继续孵育,48小时以前死亡的鸡胚弃去不计,在48~120小时死亡的鸡胚随时取出,收获鸡胚液,同一稀释度的胚液等量混合,按稀释度分别测定红细胞凝集价,至120小时,取出所有活胚,逐个收获鸡胚液,分别测定红细胞凝集价,凝集价?1:160(微量法1:128)者判为感染,计算EID,?10EID。、霉菌、支原体和外源病毒污染,分别按《无菌检验或纯粹检验标准操作规程》、《支原体检验标准操作规程》、《外源病毒检验标准操作规程》进行。-15?以下保存,应不超过1年。。2制苗材料选择选择发育良好的9~11日龄SPF鸡胚作为制苗材料。3制苗用毒液的制备-4-(如10或10),,接种后密封针孔,置36~37?继续孵育,不必翻蛋。,每日照蛋一次,将在60小时前死亡的鸡胚弃去。60小时后,每4~8小时照蛋一次,死亡的鸡胚随时取出,直至96或120小时,不论死亡与否,全部取出,气室向上直立,置于2~8?冷却。~24小时的鸡胚取出,用碘酊消毒气室部位,然后以无菌手术剥除气室部卵壳,剪开尿囊膜,吸鸡胚液,每若干个鸡胚的胚液混合为一组。收获后的胚液置于灭菌瓶中,作好标识,留样后,结冻保存。在收获胚液的同时,应逐个检查鸡胚,如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去不用。,每组分别取样,按《无菌检验或纯粹检验标准操作规程》进行无菌检验,应无细菌生长。-7-8-9按含毒鸡胚液量用灭菌生理盐水作为10倍系列稀释,取10、10、103个稀释度各尿囊继续孵育,48小时以前死亡的鸡胚腔内接种10日SPF鸡胚5个,,置36~37?弃去不计,在48~120小时死亡的鸡胚随时取出,收获鸡胚液,同一稀释度的胚液等量混合,按稀释度分别测定红细胞凝集价,至120小时,取出所有活胚,逐个收获鸡胚液,分别测定判为感染,计算EID,,凝集价?1:160(微量法1:128)者507量>10EID者可用于配制疫苗。505配苗及分装将检验合格的若干组鸡胚液滤过,混合于同一容器内,按规定羽份,加一定比例的蔗糖脱脂奶粉作稳定剂,%,脱脂奶粉含量为5%,同时加入适宜的抗生素,6充分摇匀,定量分装,每羽份病毒含量应?10EID。分装后迅速进行冷冻真空干燥。,打印出的羽份或头份、生产批号、有效日期清晰可见、。瓶上的铝盖稳固不松动。,海绵状疏松团块,然后再轻微振动,疫苗松动并与瓶壁分离,判为合格。,经轻微振动,疫苗应迅速完全溶解,无粘块或粘团出现,判为溶解性良好。《无菌检验或纯粹检验标准操作规程》进行,如有菌生长,应进行杂菌计数,并作病原性鉴定(按《杂菌计数和病原性鉴定操作细则》进行)和禽沙门氏菌检验每羽份非病原菌数应不超过1个(按《禽沙门氏菌检验法》进行)。《支原体检验法》进行,应无支原体生长。,划出尿囊腔接种部位。,与等量抗鸡新城疫病毒特异性血清50混合,室温中和1小时后,尿囊腔接种,。,置37?继续孵育,观察120小时,在24~120小时内应不引起特异死亡,且至少存活8只,鸡胚液作红细胞凝集试验,应为阴性。《外源病毒检验法》进行。。,尿囊腔内接种10日龄鸡胚10只,(含10个使用剂量),接