泰妙菌素摇瓶发酵工艺优化研究+-+泰妙菌素摇瓶发酵工艺优化研究.doc

泰妙菌素摇瓶发酵工艺优化研究-泰妙菌素摇瓶发酵工艺优化研究泰妙菌素摇瓶发酵工艺优化研究吴致军张萍王果沙艳玲(宁夏多维药业有限公司菌种研究所,银川750006)[收稿日期]2008-8-25[文献标识码][文章编号][中图分类号][摘要]:泰妙菌素菌种采用正交实验设计对摇瓶发酵配方进行了优化,使得摇瓶效价(指发酵液中截短侧耳素含量)从4992μg/mL提高到了9850μg/mL,%,并对摇瓶发酵工艺进行了多方面摸索和调整,完成了引进泰妙菌素菌种的消化吸收。[关键词]:摇瓶效价;优化;正交实验设计抗生素菌种的摇瓶效价是标志菌种生产能力的重要指标,不仅是验证该菌种种子阶段菌种制备是否正常的依据,而且也是菌种选育过程中用到的首要指标。菌种摇瓶效价正常与否,不仅影响原材料验证、工艺调整和正常生产;而且也决定菌种选育的成与败。为此,我们对种子瓶制备中的菌丝铲取量多少及研磨程度[1-2]进行研究,用正交实验设计对摇瓶发酵配方进行了优化,%,达到9850μg/mL,同时对发酵瓶的接种量、通气量[3]及培养周期对摇瓶效价的影响进行了深入研究,完成了引进菌种的消化吸收工作。::L-20080314?宁夏多维药业有限公司国外引进。:Waters600高效液相色谱仪(2487型紫外检测器),美国Waters公司;TDL-5-A型台式离心机;JA203型电子天平,上海海康电子仪器厂;pHS-3C精密pH计,上海精密科学仪器有限公司;SPX-250B-Z型生化培养箱,上海博迅实业有限公司医疗设备厂;CX31RBSF型显微镜,菲律宾奥林巴克公司;组织研磨器以及其它实验室常用的仪器设备。作者简介:吴致军(1962年-),男,抗生素专业高级工程师、执业药师,主要从事抗生素生产菌种的制备、保藏和菌种选育工作。E-mail::葡萄糖,天京市瑞金特化学品有限公司;玉米浆,华北制药康欣有限公司;酵母膏,北京奥博星生物技术有限责任公司;黄豆粉,银川市荷兰县豆饼粉厂;豆油,西安邦琪油脂公司;MgSO?7HO,天津市大茂化学试剂厂;42Ca(NO)?4HO,天津市大茂化学试剂厂;KHPO,天津市永大化学试剂开发中心;32224NaCl,天津市化学试剂六厂。:甲醇:色谱纯乙腈:色谱纯水:纯化水氢氧化钾::,用5%氢氧化钾溶液调pH,,将溶液移至1000mL容量瓶,并用纯化水稀释至刻度。截短侧耳素标准样品:已知含量?%:高效液相色谱仪:Waters2695/2487R色谱柱:×250mm不锈钢柱,5μmSymmetry?:截短侧耳素是一种二萜烯类抗生素,从截短侧耳素经半合成可得到延胡索酸泰妙菌素。通过用高效液相色谱法测定发酵液中的截短侧耳素含量作为摇瓶效价。:流动相为甲醇-1%碳酸铵溶液(6:4,V/V);流速:;检测波长:212nm;进样量:20μL。:,于10mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容,摇匀即得标准样液。