广西尖吻蝮蛇毒抗肿瘤组分的分离纯化及活性的研究.pdf.pdf

广西医科大学硕士学位论文广西尖吻蝮蛇毒抗肿瘤组分的分离纯化及活性的研究姓名:李映新申请学位级别:硕士专业:药理学指导教师:雷丹青 20070501 广两尖吻蝮蛇毒抗肿痈纽分的分离纯化及活性的研究硕l‘研究生学位论文缩略词 Tris SDS A2780 ECV304 RPMll640 DMSo MTT PBS IC50 IR FCM FN CAM 主要缩略词英文全称 Trishydroxymethlaminomethane Sodium dodecyl sulphate Human ovary cancer cellline Human gastiric canrcinoma cellline Endothelial cellline Roosevelt ParkMemorial Institutemedium etraacetic acid disodium salt Dimethyl sulfoxide 3一(4,5-dimethylthiazol-2-y1)一2,5- diphenylketone residuum bromide Phosphate-buffered Saline Median inhibitory concentration Inhibition rate Hematoxylin andEosin Acridine orange andEthidium bromide Flow cytometry Fibronectin Chickembryo chorioallantoic membrane 中文全称三羟甲氨基甲烷十二烷基磺酸钠人卵巢癌细胞系人胃癌细胞系人脐静脉细胞系 1640培养基乙二胺四乙酸二钠盐二甲基亚砜二甲基噻唑二苯基四唑溴盐磷酸盐缓冲液半数抑制浓度抑制率苏木素一伊红吖啶橙一溴乙啶流式细胞仪纤维连接蛋白鸡胚尿囊膜独创性声明秉承学校严谨的学风与优良的科学道德,本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切责任。论文作者签名:茑¨矗“日期: 保护知识产权说明本人完全了解广西医科大学有关保护知识产权的规定,即: 研究生在校攻读学位期间,博士后工作人员、人才小高地工作人员在校工作期间,论文工作的知识产权单位属广西医科大学。本人保证在校期间和离校后,发表或使用论文工作成果时署名第一作者单位均为广西医科大学。学校有权保留论文,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。普嘉尊糙各犯1 广两尖吻蝮蛇毒抗肿痈纽分的分离纯化段活性的研究硕i:研究生学位论文广西尖吻蝮蛇毒抗肿瘤组分的分离纯化及活性的研究摘要目的:从广西尖吻蝮蛇毒中分离纯化一种小分子多肽(K组分), 研究其对癌细胞株的诱导凋亡作用及其他抗肿瘤相关机制。方法:经 Sephadex ,超滤和DEAE Sepharose ,;采用MTT法和平板集落形成实验检测其对癌细胞株的生长抑制情况;,(FCM)检测调亡的发生; PI单染流式细胞术检测K组分对细胞周期的影响;通过细胞黏附实验检测对肿瘤细胞黏附能力的影响; 观察K组分对人脐静脉血管内皮细胞株的生长抑制和黏附抑制作用,并建立鸡胚尿囊模型观察其抗血管生成的活性。结果:从广西尖吻蝮蛇毒中分离纯化出的具有抗肿瘤活性的小分子多肽,,分子量为7862D左右。该组分对肿瘤细胞增殖有不同程度的抑制,对人卵巢癌细胞株A2780作用12、24、48h的半数抑制浓度(IC50) g/ml、 pg/ml、 g/ml:、24、 lag/ml、 ug/ml、 lag/ml。~ ktg/ml时,对A2780的集落形成抑制率从24~87%,。“g/ml的药物作用24h后的A2780 细胞呈典型的凋亡形态学特征:细胞变小,细胞质浓缩,染色质边集碎裂, 胞浆内出现空泡,细胞膜完整等; ug/