实验进展报告.doc

. 实验进展报告一中华补血草中总黄酮含量的测定 1 芦丁对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品 20mg 于 1oomL 容量瓶中,加 60% 的乙醇置水浴中加热溶解, 冷却, 用 60% 的乙醇定容至刻度,即为 的芦丁对照品溶液,摇匀,备用。精密量取 25m L 上述对照品溶液,置于 50mL 容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,即为 / mL 的芦丁对照品溶液,摇匀,备用。 2 最大吸收波长的选择精密吸取 岁 mL 的芦丁对照品 lmL 溶液置于 10mL 容量瓶中,加 30% 乙醇使成 smL , 先加 5%N 咖 O: 溶液 ,摇匀,放置 6min ,再加 10%Al 伽伪)3 溶液 ,摇匀,放置 6min ,加 4%NaOH 溶液 4mL , 用蒸馏水稀释到 10mL , 摇匀, 放置 15min , 以空白试剂为参比, 在波长 400 一 600nrn 范围内进行光谱扫描,确定最大吸收波长。 3 芦丁标准工作曲线的绘制准确吸取 留 mL 的芦丁对照品溶液 、 、 、 、 、 分别置于 10m L 容量瓶中, 各加 30% 乙醇使成 smL , 先加 5%NaNO: 溶液 , 摇匀, 放置 6min , 再加 10%A I 伽 03)3 溶液 , 摇匀, 放置 6min ,加 4%NaOH 溶液 4mL , 各用蒸馏水稀释到 10mL , 摇匀, 放置巧 min ,以第一管作空白,在最大吸收波长处测定吸光度值,以吸光度值为纵坐标,芦丁对照品溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线,结果见图 4 重现性试验精密称取 5 份中华补血草粉末各 lg 于三角瓶中,加入 50mL 浓度为 50% 的乙醇溶液,超声处理 20min ,抽滤,重复提取一次( 预备试验中经测定,重复提取一次后总黄酮已基本提尽), 合并提取液, 定容至 100mL 。精密吸取 lmL 溶液置于 10mL 容量瓶中, 按上述显色方法显色后,以空白试剂为参比,在最大吸收波长处测定吸光度值。 5 显色稳定性试验将上述中一组测定后的样品溶液, 按显色方法显色后, 以空白试剂为参比, 每隔 10mi n 后测定一次吸光度值,连续测定至第 60min 。 6 加样回收率试验. 分别精密量取己知总黄酮含量的果皮提取液 5份, 分别加入一定量的芦丁对照品作回收率试验, 按显色方法显色后, 以空白试剂为参比, 在最大吸收波长处测吸光度值, 按下面公式计算回收率。回收率= (测得黄酮含量一样品中黄酮含量) / 加入芦丁对照品量*100% 7 样品溶液的制备及总黄酮含量的计算准确称取中华补血草粉末 lg 于三角瓶中, 加入 5OmL 浓度为 50% 的乙醇溶液, 超声处理 20min ,抽滤,重复提取一次( 预备试验中经测定,重复提取一次后总黄酮己基本提尽) ,合并提取液,定容至 100mL 。精密吸取 lmL 溶液置于 10mL 容量瓶中,加 30% 乙醇使成 5mL ,先加 5%NaNO: 溶液 , 摇匀, 放置 6min , 再加 10%AI(N03)3 溶液 , 摇匀, 放置 6min , 加 4%NaOH 溶液 4mL ,用蒸馏水