超氧化物歧化酶SOD提取.doc

超氧化物歧化酶SOD提取.doc1・实验材料:玉米籽粒。:注意配好每一试剂时,应立即转入试剂瓶当中,不要将试剂放在容量瓶当中存放,一定要及时将试剂瓶贴好相应的标签,标明溶液的浓度、pH值、体积、试剂名称、配制时间、配制人。配制时一定要标清,使用时注意不要将其弄掉,这一点将给您带来无比的快捷和方便。在未经老师允许的情况下,不要随意倒掉实验室内的任何药品或试剂。(1)1%次氯酸钠:用移液管准确吸取4mL次氯酸钠,置于500mL大烧杯中再用量筒准确量取400mL自来水稀释该次(2)提取缓冲液:,pH7&具体配制方法如下:首先是1mol/。1mol/LKH2PO4溶液:,置于50mL小烧杯中,用少量蒸馆水溶解后,移入100mL容量瓶中,用蒸馆水定容至刻度。1mol/LK2HPO4溶液:,置于50mL小烧杯中,用少量蒸馆水溶解后,可稍加热,移入100mL容量瓶中,用蒸馆水定容至刻度。取5mLa液与55mLb液混合后,,该液即为1mol/L的磷酸钾缓冲液母液。(内含1mmol/%0■疏基乙醇):称取EDTA-2Na-,用少量蒸馆水溶解后,移入1OOOmL容量瓶中,用移液管吸取1mL基乙醇置入该1OOOmL容量瓶中,用50mL量筒量取50mLc液至该1OOOmL容量瓶中,用蒸馆水定容至刻度。(3)测试缓冲液:—磷酸钠缓冲液具体配制方法:—NaH2PO4缓冲液母液的配制。称取Na2HPO4-12H2O(MW=),加少量蒸馆水溶解后,移入1OOOmL容量瓶中,用蒸馆水定容至刻度。称取NaH2PO4・2H2O(MW=),加少量蒸馆水溶解后,移入100mL容量瓶中,用蒸馆水定容至刻度。量取915mLa液与85mLb液混合后,。称取L-Me<MW=),移入50mL容量瓶中,。(4)-4mol/L氯化硝基四氮哩蓝(NBT)称取NBT(MW=),用少量蒸馆水溶解后,移至100mL容量瓶中,用蒸馆水定容至刻度(最好现用现配,也可贮于冰箱中用2~3d'(5)2x10-5mol/L核黄素溶液称取EDTA(MW=292),用少量蒸馆水溶解。称取核黄素(MW=),用少量蒸馆水溶解。合并a液和b液,移入100mL容量瓶中,并充分用蒸馆水洗净上述a和b两个小烧杯,将洗液移入该容量瓶中,再用蒸馆水定容至刻度(,核黄素2mmol)o贮于冰箱中,避光保存。测定酶活临用前,将c液稀释100倍,即为2x10-5mol/L核黄素溶液。(6)苯甲酸钠:1瓶。(7)BaCI2:1瓶。