高效液相色谱仪(HPLC)校正方法.doc

高效液相色谱仪(HPLC)校正方法.doc高效液相色谱仪(HPLC) 输液系统:±3%<±2%<±2%(TAU,基线漂移不超过5X10'(6次进样)%.4可调波长紫外可见光检测器波长示值不超过±2nm(HP1100高效液相色谱仪可由仪器自身完成)校正条件1 环境温度10-30°C,相对湿度低于65% , 、纯水,.3紫外波长标准溶液校正方法1 ,A溶剂为水,%丙酮的水溶液,B经5个阶段从0变到100%,20%—40%—60%—80%—100%,重复测量两次,取平均值,求各段梯度误差Gci,取最大作为仪器梯度误差,公式:Gci=(Li—Lm)/LmXlOO%Li:第i段信号值的平均值;Lm:各段输出信号平均值的平均值可接受标准:-3%WGciW3%2泵流量设定值误差Ss、、进样器、色谱柱和检测器联接好,以甲醇为流动相,按表一设定流量,待流速稳定后,在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相,同时用秒表计时,准确的收集10-25分钟,称重,按下式计算流动相流量设定值误差Ss和流动相流量稳定性误差Sr。公式:Ss=(Fm-Fs)/Fs100%可接受标准:-2%WSsW2%SR=(Fmax-Fmin)/FX100%可接受标准:-2%WSrW2%Ss:流量设定值误差(%): Fm=(W2-Wi)/:流量实测值(ml/min)W2:容量瓶+流动相的重量(g); W1:容量瓶的重量(g);Fs:流量设定值(ml/min);Pt:实验室温度下流动相的密度(g/cm3);t:收集流动相的时间(min);Sr:流量稳定性误差(%);Fmax为同一组测量中流量最大值(ml/min);Fmin:同一组测量中流量最小值(ml/min):F为同一组测量值的算术平均值(ml/min)表一:Ss和Sr的校正流量设定值(ml/min)(min)1510允许误差S,2%2%Sr2%2% ,以波长254nm,流动相为100%甲醇,,仪器稳定后记录基线30min,求基线噪声Nd。可接受标准:NdW5X10“(AU/h)表示。可接受标准:DW5Xl(TAU/ 以上述色谱条件下,进样20ul的1XloWml的蔡甲醇溶液,计算最小检测浓度G。公式:Cl=2NdCX20HV呱:基线噪声,mm; C:标准溶液浓度,g/ml;H:标准溶液色谱峰的峰高,mm;V——进样体积,ul。 可接受标准:GWlXlO^g/ 定量测定重复性的校正将仪器联接好