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山西医科大学
硕士学位论文
表没食子儿茶素没食子酸酯通过PI3K-Akt信号通路诱导胰腺癌
细胞凋亡的研究
姓名:林镇海
申请学位级别:硕士
专业:外科学
指导教师:张炳太
2011-05-25
山西医科大学硕士学位论文
表没食子儿茶素没食子酸酯通过 PI3K-Akt 信号通路
诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

中文摘要
研究目的:通过研究表没食子儿茶素没食子酸酯((−)-Epigallocatechin-3-gallate,
EGCG)诱导胰腺癌 PANC-1 细胞发生凋亡以及在其凋亡过程中 EGCG 对 PI3K-Akt 信号
通路影响,探讨 EGCG 通过 PI3K-Akt 信号通路诱导胰腺癌细胞凋亡的机制。
研究方法:
1. 体外培养胰腺癌 PANC-1 细胞,使用不同浓度的 EGCG(0µg/mL,25µg/mL,
50µg/mL、75µg/mL、100µg/mL)进行干预,并按浓度分组,干预 12h、24 小 h、
36h 和 48h 后,分别通过倒置相差显微镜观察各组胰腺癌细胞生长情况。
2. MTT 法检测不同浓度的 EGCG(0µg/mL,25µg/mL,50µg/mL、75µg/mL、
100µg/mL)对胰腺癌细胞分别干预 12h、24h、36h 和 48h 的细胞存活率。
3. 应用流式细胞仪技术,通过 AnnexinV-FITC/PI 双染法检测不同浓度组的 EGCG
对胰腺癌细胞干预 24h 后的细胞凋亡率。
4. Western-blot 检测 p-Akt、Akt、Caspase-3、Bax 和 Bcl-2 蛋白的表达情况。
研究结果:
1. 倒置显微镜镜观察显示:EGCG 能够抑制 PANC-1 胰腺癌细胞的生长,当 EGCG
浓度大于 25µg/mL,干预时间为 24h,可明显看到细胞数量的减少。随着 EGCG
浓度的增加,贴壁细胞数量逐渐减少。
2. MTT 检测结果显示:随着 EGCG 浓度的增加和干预时间的延长,EGCG 对 PANC-1
细胞生长的抑制作用逐渐增强且具有明显的时间-剂量依赖性。其中,50µg/mL
的 EGCG 干预 24h,细胞的存活率为(±)%(P<);而 100µg/mL
的 EGCG 抑制作用最强,48h 细胞存活率仅为(±)%(P<)。
3. 流式细胞检测结果显示:EGCG 可以诱导 PANC-1 细胞凋亡,随着 EGCG 浓度的
增加,PANC-1 细胞的凋亡增加,且 EGCG 主要诱导 PANC-1 发生早期凋亡。
4. 通过 Western-blot 检测显示:在 EGCG 干预 24h 后,随着 EGCG 干预浓度的增加,
p-Akt 的表达逐渐降低,并呈现浓度依赖性(P<),而 Akt 的表达无显著差
异(P>);随着 EGCG 浓度的增加,Caspase-3 表达逐渐增加,呈现浓度依
赖性(P<);随着 EGCG 浓度的增加,PANC-1 细胞中的 Bax 表达升高,而
Bcl-2 表达逐渐下降,Bax/ Bcl-2 的比值随着 EGCG 浓度的增高而增大,并成浓
度依赖性(P<)。
研究结论:
1. EGCG 能够抑制 PANC-1 胰腺癌细胞的增殖,并呈浓度依赖性。
2. EGCG 能够诱导 PANC-1 胰腺癌细胞凋亡。
3. EGCG 在胰腺癌 PANC-1 细胞中抑制了 PI3K-Akt 信号通路中 Akt 的磷酸化过程,
上调了 Caspase-3 和 Bax 的表达,下调了 Bcl-2 的表达,从而发挥了诱导细胞凋
亡的作用。
关键词:胰腺癌;EGCG;PI3K-Akt;凋亡
I
山西医科大学硕士学位论文
Study of PANC-1 Cells apoptosis of Pancreatic Cancer
induced by Epigallocatechin-3-gallate via PI3K-Akt Signaling pathway

Abstract
Objective
We study apoptosis of the PANC-1 cells of the pancreatic cancer (PCPC) and the effect on
PI3K-Akt signaling pathway induced by Epigallocatechin- 3-gallate(EGCG) in order to expl