何谓蛋白质的两性解离.doc

何谓蛋白质的两性解离?利用此性质分离纯化蛋白质的常用方法有哪些? 蛋白质分子中除两端的氨基和羧基可解离外, 氨基酸残基侧链中某些基团, 在不同的 pH 溶液中可解离成正离子或负离子, 因此蛋白质分子即可带有正电荷又可带有负电荷, 这种性质称为蛋白质的两性解离。根据蛋白质的两性解离性质, 可采取电泳法和离子交换层析法分离纯化蛋白质。什么是蛋白质的变性作用?引起蛋白质变性的因素有哪些?变性的机制是什么?举例说明实际工作中应用和避免蛋白质变性的例子。在某些物理和化学因素作用下,蛋白质特定的空间构想被破坏,即有序的的空间结构变成无需的空间结构,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失,称为蛋白质的变性。因素:高温高压、紫外线等,强酸、强碱、有机溶剂。应用举例: 临床医学上, 变性因素常被应用来消毒及灭菌。防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂(如疫苗等)的必要条件。怎样避免蛋白质变性: 我们可通过控制温度, 来控制蛋白质的性质向着有利于我们需要的方面进行. 阐述蛋白质的结构与功能的关系。 1. 蛋白质一级结构是高级结构与功能的基础 a. 一级结构是空间构象的基础 b. 一级结构相似的蛋白质具有相似的高级结构与功能 c. 氨基酸序列提供重要的生物进化信息 d. 重二、蛋白质的功能依赖特定空间结构 2. 蛋白质的功能依赖特定空间结构 3. 蛋白质高级结构是其执行生物功能的结构基础举例说明蛋白质的变构效应蛋白质的别构效应:别构(变构)效应:是指蛋白质在执行功能过程中,其构象发生改变, 从而提高或降低分子的生物活性,这就叫别构效应。具有别构效应的蛋白质称为别构蛋白质。具有别构效应的蛋白质通常是二条以上的肽链组成的寡聚蛋白质。别构效应广泛存在, 它是调节蛋白质生物功能的重要方式。维系蛋白质结构的化学键有哪些?它们分别在哪一级结构中起作用。有氢键、范德华力、疏水键、离子键。此外还有共价二硫键、配位键和酯键。维系一级结构:肽键、二硫键维系二级结构:氢键维系三级结构:疏水键、氢键、范德华力、离子键维系四级结构; 范德华力、离子键试述常用分离和纯化蛋白质的方法并说明其基本原理。蛋白质分离纯化的方法主要有: 盐析、透析、凝胶过滤( 分子筛)、电泳、离子交换层析( 色谱)、超速离心等方法。原理: 盐析主要是利用不同蛋白质在不同浓度的中性盐溶液中的溶解度不同, 向蛋白质溶液加入中性盐, 破坏水化膜和电荷两个稳定因素, 使蛋白质沉淀。透析是利用仅有小分子化合物能通透半透膜, 使大分子蛋白质与小分子化合物分离, 达到除盐目的。凝胶过滤柱内填充带小孔的葡聚糖颗粒, 样品中小分子蛋白质进入颗粒, 而大分子蛋白质则不能进入, 由于二者路径长短不同, 故大分子先于小分子流出柱, 可将蛋白质按分子量大小不同而分离。蛋白质是两性电解质, 在不同 PH 溶液中所带电荷种类和数量不同, 故在电场中向相反的电极方向泳动, 电泳的速度取决于场强、蛋白质所带电荷数量和其分子大小与形状。根据不同蛋白质的密度与形态区别, 可用超速离心法, 使其在不同离心力作用下沉降, 达到分离目试比较 DNA 和 RNA 在化学组成、分子结构、细胞内分布和生物学功能上的异同点。 DNA RNA 化学组成 A、G、C、T 脱氧核糖 A、G、C、U 核糖分子结构一级结构: 3′,5′-磷酸二酯键彼此连接而形成的核苷酸链二级结构:双螺